[发明专利]澳洲坚果组培扩繁方法

说明书

本发明涉及植物组培技术，具体为一种澳洲坚果组培扩繁方法，通过对澳洲坚果当年生嫩茎处理、消毒，分别置于启动培养基、增殖培养基以及生根培养基中进行组培，以达到快速扩繁的目的。该方法通过生物技术对澳洲坚果进行组织培养研究，建立一套完整的澳洲坚果组织培养体系，大量提供无菌种苗，同时提高澳洲坚果种苗质量，实现规模化生产，满足生产上的需要，解决了澳洲坚果生根困难的问题。

技术领域

本发明涉及植物组培技术领域，具体为一种澳洲坚果组培扩繁方法。

背景技术

澳洲坚果（Macadamia integrifolia & Macadamia Tetraphylla）是山龙眼科（Proteaceae）常绿乔木，起源于澳大利亚东部的热带雨林中，目前的栽培品种主要是澳洲坚果属（Macadamia F.Muell）的光壳种（M.integrifolia）和粗壳种（M.tetraphylla）及二者的杂交种。澳洲坚果果仁脂肪含量超过70％，单不饱和脂肪酸含量极高，棕榈油酸的含量也异常丰富，且几乎不含胆固醇。澳洲坚果引入中国栽培仅有30 多年， 是一种新兴果树。目前在云南、广东、广西、贵州等热区省均有种植，但云南是中国澳洲坚果的主产区，其种植面积及产量均占全国90％以上。

澳洲坚果一般采用实生繁殖，但实生树可能要8~12年才能有收获。此外，由于澳洲坚果多采用开放式授粉，因此也造成异花授粉得到的果实的品质难以预测。而在苗圃、果园生产上通常采用嫁接，偶见扦插。但在扦插繁殖中，根系系统需要较长的时间才可形成，同时扦插繁殖的树种需要进行辅助管理，如修剪、整形等。因此制约了澳洲坚果的大面积推广。

组织培养繁殖已应用于许多林木、木本果树和观赏性作物的快速繁殖。同时，由于采用组织培养进行繁殖可产生无污染的植物，可有效降低植物疫病传播风险，因此，组织培养也提高了种质交换的安全性。因此，开展澳洲坚果组织培养技术的研究，建立一套适合于澳洲坚果的组织培养体系，对加快澳洲坚果的良种繁育进程具有重要意义。

目前对澳洲坚果快速繁育的研究，多数基于砧木的嫁接技术，例如专利申请号为201510322271.3，名称为澳洲坚果高效繁育方法的专利，公开了一种基于嫁接的快速繁育方法，采用生长激素为“每 10 克赤霉素 920 和吲哚乙酸的混合物兑 5 千克水溶解后，加入 10 毫升甲基托布津制成药水”对接穗进行浸泡。

专利申请号为201510868889.X，名称为澳洲坚果的组织培养快速繁殖方法的专利，公开了一种澳洲坚果的组培方法，虽公开了一种澳洲坚果的组培方法，但其实施步骤B培养时间20-24天，步骤C分步骤培养20-24天后，每天光照18h培养直至生根，其公开的效果生长周期长，且生根率仅达到85.9%，增殖系数也不甚理想，不能满足工业化生产的需求；其次，权利要求1中所述的粪肥提取液成分复杂，有些成分难以获得，难以应用推广；另外，该专利中构建的特定培养床，实施时都会增加工业化生产时的成本投入。

发明内容

针对现有的澳洲坚果组培方法效果不佳的问题，本发明提出一种澳洲坚果组培扩繁方法。

本发明的澳洲坚果组培扩繁方法，其特征在于通过以下步骤实施：

（1）外植体的选择与消毒：选取澳洲坚果的当年生嫩茎，去除叶柄和叶片，洗净后用1%的洁尔灭消毒液浸泡5-10分钟，冲洗1-2小时，剪成1-2cm长含1-2个叶腋的茎段，用75%乙醇润后消毒，用0.1%升汞浸泡5-8分钟，无菌蒸馏水冲洗5-8次，吸干外植体表面的残留水分；