[发明专利]一种表达鲑鱼降钙素的方法及其专用表达盒有效
申请号: | 201710015196.5 | 申请日: | 2017-01-10 |
公开(公告)号: | CN106591356B | 公开(公告)日: | 2020-02-14 |
发明(设计)人: | 刘昱辉;李梅;贾士荣;王志兴 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院生物技术研究所 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;C12N15/62;C07K14/585;A01H5/00;A01H6/20 |
代理公司: | 11245 北京纪凯知识产权代理有限公司 | 代理人: | 关畅;何叶喧 |
地址: | 100081 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 表达 鲑鱼 降钙素 方法 及其 专用 | ||
1.一种表达鲑鱼降钙素的方法,依次包括如下步骤:
(1)将含有表达盒的重组载体导入受体植物,得到转基因植物;
所述表达盒自上游至下游依次包括如下元件:植物油体蛋白基因的启动子、融合基因和终止序列;
所述融合基因中含有区段甲和区段乙;所述区段甲编码植物油体蛋白;所述区段乙编码鲑鱼降钙素的前体;所述鲑鱼降钙素的前体为氨基酸序列如序列表中序列5自N末端起第158至190位所示的蛋白质;
所述植物油体蛋白基因的启动子为油菜油体蛋白基因的启动子;所述植物油体蛋白为芝麻油体蛋白;所述终止序列为Nos polyA终止子;
所述区段乙为核苷酸序列是序列表中序列1自5′末端起第22至120位所示的DNA分子;
(2)通过培养所述转基因植物得到鲑鱼降钙素;
所述受体植物为油菜品种中双4号。
2.如权利要求1所述方法,其特征在于:所述融合基因还包括一个以上区段丙;所述区段丙编码蛋白标签。
3.如权利要求1或2所述方法,其特征在于:所述融合基因还包括区段丁;所述区段丁为蛋白酶的酶切识别序列。
4.如权利要求3所述方法,其特征在于:所述蛋白酶为满足如下条件的蛋白酶:所述蛋白酶对于所述融合基因的表达产物的酶切位置为特定氨基酸残基与其前一位氨基酸残基之间;所述特定氨基酸残基为所述鲑鱼降钙素的前体的第一个氨基酸残基。
5.如权利要求4所述方法,其特征在于:所述融合基因自上游至下游依次包括如下区段:所述区段丙、所述区段甲、所述区段丁和所述区段乙。
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