[发明专利]基于功能化金纳米粒子的新型比色传感器检测毒死蜱

权利要求书

1.基于功能化金纳米粒子的新型比色传感器检测毒死蜱，其特征是利用核酸适体的特异性识别及其与金纳米粒子静电吸附作用的优势，构建一种新型比色传感器来检测果蔬中毒死蜱的残留，包括以下步骤：巯基乙胺修饰的正电金纳米粒子(CS-AuNPs)的合成；通过测定紫外可见吸收光谱观察金纳米粒子、核酸适配体和目标物毒死蜱体系的反应；利用目标物与适配体的特异性结合检测毒死蜱并进行实际样品的检测。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述巯基乙胺修饰的正电金纳米粒子(CS-AuNPs)的合成步骤如下：

在避光的条件下，将400μL巯基乙胺盐酸盐(0.213M)和40mL氯金酸(1.40mM)加入到100mL圆底烧瓶中，在磁力搅拌器上搅拌20min，注意避光，然后边搅拌边迅速加入新配置的NaBH₄溶液10mL(10mM)，继续搅拌30min，最终制得酒红色溶液，将所得溶液用0.45μm的微孔滤膜过滤，滤液装入棕色试剂瓶中，在4℃的冰箱中保存，备用。

3.如权利要求1所述的方法，其中所述通过测定紫外可见吸收光谱观察金纳米粒子、核酸适配体和目标物毒死蜱体系的反应的步骤如下：

向1.5mL离心管中加入20μL毒死蜱适配体(2nM)然后分别加入1μg/mL不同体积的毒死蜱标准溶液，加入蒸馏水稀释至500μL体系，使得毒死蜱的终浓度分别为1,5,10,20,40,60ng/mL；漩涡混合8min后，再加入60μL金纳米粒子(终浓度为0.077nM)，震荡均匀，反应10min，观察所得到溶液的颜色，并用紫外分光光度计测定溶液的紫外可见吸收光谱，所有实验均在室温下进行。

4.如权利要求1所述的方法，其中所述利用目标物与适配体的特异性结合检测毒死蜱的步骤如下：

向含有60μL AuNPs和2nM核酸适配体的混合体系中，分别加入不同浓度的毒死蜱标准溶液，室温条件下反应8min后，测定该体系的紫外可见吸收光谱，CS-AuNPs在535nm处的吸收值(A₅₃₅)将随着毒死蜱浓度的不同而发生变化。

5.如权利要求1所述的方法，其中所述实际样品的检测是取苹果提取液进行：称取试样10g(精确到0.01g)于20mL离心管中，加6g无水硫酸钠和30mL乙酸乙酯，均质2min，在5000r/min离心5min，上清液过滤于250mL容量瓶中，残渣加入30mL乙酸乙酯再提取一次，过滤，合并滤液于250mL容量瓶中，备用，如权利要求4所述的方法，加入不同浓度的毒死蜱标准溶液进行测定，分别以毒死蜱的浓度和A₅₃₅为横纵坐标建立标准曲线，计算毒死蜱的检出限为0.83ng/mL，线性范围为1-110ng/mL。