[发明专利]肿瘤坏死因子-α(TNF-α)结合适配体及其治疗用途

说明书

本发明公开一种如序列编号1或序列编号2所示的肿瘤坏死因子‑α(TNF‑α)结合RNA适配体及其治疗用途。

技术领域

本发明涉及一种与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)进行特异性结合的适配体及其治疗用途{TNF-α-BINDING APTAMER,AND THERAPEUTIC USE FOR SAME}。

背景技术

肿瘤坏死因子-α(TNF-α)是一种由包括巨噬细胞、单球细胞在内的免疫系统细胞分泌且与免疫系统的细胞发生反应的促炎性(pro-inflammatory)细胞因子，其非正常过表达会对包括验证反应在内的败血症、感染症、自身免疫性疾病、抑制排斥反应等各种疾病起到介导作用(Annu.Rev.Immunol.10:411-452,1992；Annu.Rev.Med.45:491-503,1994)。

由于如上所述的原因，已经开发出了以肿瘤坏死因子-α(TNF-α)作为标的的多种抗体医药品。以肿瘤坏死因子-α(TNF-α)作为标的的代表性的抗体医药品包括如注射用依那西普(Enbrel^TM)、英夫利昔单抗(Remicade^TM)、阿达木单抗(Humira^TM)、赛妥珠单抗(Cimzia^TM)等。但是，虽然注射用依那西普能够在利用脂多糖(LPS)进行处理的人髓系白血病单核细胞(THP-1)中对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的分泌进行抑制，但有报告指出也可能会因为细胞结合肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的6倍左右的过表达而导致副作用(IntImmunopharmacol.8(5):679-87,2008)的出现，而英夫利昔单抗作为由鼠类可变区和人IgG1恒定区组成的嵌合抗体，具有诱发ADCC(抗体依赖性的细胞介导的细胞毒作用，antibody dependent cellularcy to toxicity)和CDC(补体依赖性的细胞毒作用，complement-dependent cytotoxicity)的问题，而赛妥珠单抗作为聚乙二醇化(pegylation)的人源化抗体，已有动物试验报告指出聚乙二醇化的蛋白质不仅具有诱发免疫反应的问题，还会因为蓄积在肾脏细胞中而形成液泡(vacuole)(Bioconjug Chem.19；24(6):915-25,2013)。

因此，可以说仍然需要开发出以肿瘤坏死因子-α(TNF-α)作为标的的特性更加优秀的药物。

适配体与抗体相同，也是能够与靶蛋白进行特异性结合的核酸配体，自从2004年美国FDA批准将以血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor)作为标的的哌加他尼钠注射液(Macugen)作为老年性黄斑变性(macular degeneration)治疗剂使用以来，在全世界范围内都在积极开展利用适配体的治疗剂的开发活动(Gene Ther 14(4):283-291,2007)。

适配体治疗剂与抗体治疗剂相比具有多种优点，首先因为是与抗体相比更小且更单纯的分子，因此能够进行化学合成且易于进行必要的化学修饰，其次还能够通过SELEX技术(指数富集的配体系统进化技术，Systematic Evolution of Ligands by EXponentialenrichment,Science 249(4968):505-510,1990；Methods Enzymol 267:275-301,1996；Methods Enzymol 318:193-214,2000；美国注册专利第5,475,096号，美国专利注册第5,270,163号，国际专利公开WO 91/19813)在体外(In vitro)提升其选择性和亲和度，进而因为与属于蛋白质的抗体不同，具有热稳定性，因此能够在室温条件下长期进行保管。此外，还具有对于难以制造出多克隆抗体的毒素等也能够制造出适配体、与抗体治疗剂不同，几乎不会在生物体内引起免疫反应、因为抗体必须在体内(In vivo)或细胞水准上制造而适配体能够充分地在体外(In vitro)水准上制造，因此能够通过化学修饰等方式轻易地对药物代谢动力学以及药效学特性进行调节等优点。