[发明专利]球虫病疫苗

说明书

本发明涉及改进的抗家禽中的球虫病的疫苗。该疫苗包含组合物中的活的艾美球虫卵囊，所述组合物由于引入了0.3至1.5%w/v黄原胶而具有相对高的粘度。在喷雾接种时，该新的疫苗形成被禽类迅速摄食并且提供快速的疫苗吸收的珠，导致攻击感染后球虫病体征的迅速和有效改善。本发明还涉及对包含黄原胶的组合物热灭菌的方法；通过引入一定浓度的金属盐，可以很大程度防止粘度的不可逆和剧烈降低。

本发明涉及兽医寄生虫学和疫苗学领域；更具体地，本发明涉及包含活的艾美球虫（Eimeria）卵囊的用于家禽的球虫病疫苗；涉及用于制备该球虫病疫苗的方法；涉及部件的试剂盒（kit of parts）；并且涉及该球虫病疫苗的施用方法。

艾美球虫是顶复门（phylum Apicomplexa）和球虫纲（class Coccidia）的原生动物寄生虫，并且在全世界存在。当感染家禽时，它们导致中度至严重的肠疾病-综合征（complex），称作球虫病。艾美球虫具有复杂的生命周期，该生命周期具有多个阶段，一些是在宿主外发育。艾美球虫感染是通过摄食孢子化卵囊（sporulated oocysts）而发生的，并且可以从第一日龄就发生。在肠中，释放子孢子，其随后通过侵入肠上皮细胞而在禽的一段肠上建群。复制导致裂殖子释放阶段，和来自宿主的肠上皮细胞的破裂。随后，裂殖子再感染另外的上皮细胞，这持续最多另外的四个4-6日的周期。最后，发育至性阶段，其产生随粪便释放的卵囊。在环境中形成孢子后，重新开始周期(Shirley 等, 2005, Adv. inParas., vol. 60, p. 285)。

可以通过多种途径，常规通过球虫的显微粒径和外观鉴定感染家禽的主要艾美球虫物种。同样，不同的艾美球虫物种倾向于在禽类肠的不同区域建群。

家禽中艾美球虫感染的症状不同，从食欲不振到由于肠中坏死组织的积累导致的血性腹泻（bloody diarrhoea）和器官衰竭。结果是饲料转化率的下降、降低的生长速度、降低的蛋产量和对继发性感染的易感性，这些全部都导致受影响的禽类的主要不适和对商业家禽经营的严重经济损害。

抗艾美球虫感染和球虫病的保护作用可以基于经由饲料施用抗球虫药物（抑球虫剂），但抗性的积累和动物产品中药物残留物的存在是持续关注的问题。因此，优选通过接种来防止家禽中的艾美球虫感染和随后的疾病。仅次于亚单位疫苗和重组DNA疫苗，最多使用的是活疫苗，其包含来自一个或多个艾美球虫物种的孢子化卵囊。它们在禽中的天然复制通过免疫系统的体液和细胞途径两者诱导强免疫。通常，在生命早期单次接种（通过偶尔野生型加强感染辅助）足够终生保护禽类。

活的球虫可以是野生型或减毒的致病型。一类特殊的减毒的艾美球虫是所谓的早熟株，它们是将在禽中以少于正常值的周期数完成它们的生命周期的艾美球虫。这些产生更低数目的卵囊排出量以及对目标的肠的更少损害。对于家禽球虫病的综述，参见: TheMerck veterinary manual (第10版, 2010, C.M. Kahn edt., ISBN: 091191093X),或: Swayne 等, eds.: “Diseases of Poultry”, 第13版, Wiley-Blackwell, Ames,IA., USA。

通常通过比较感染和疾病的主要标准确定艾美球虫疫苗的效力，所述标准是：用毒性艾美球虫株攻击感染后的肠病变得分、卵囊排出量的降低和对体重增长的影响。描述评估艾美球虫疫苗效力的这些标准的相关性的一篇文献是：Williams & Catchpole,(2000, Vaccine, vol. 18, p. 1178-1185)。

活的艾美球虫疫苗一般将包含来自几种艾美球虫物种的孢子化球虫，因为免疫是物种特异性的。例如，一些用于家禽的商业球虫病疫苗是：来自MSD动物健康中心疫苗生产线（MSD Animal Health, the vaccine lines）的Coccivac™、Paracox™或Fortegra™，它们包含来自最多8个艾美球虫物种的不同株的活的孢子化球虫。其它商业艾美球虫疫苗是Immucox™ (Ceva)和Inovocox™ (Zoetis)。