[发明专利]融合蛋白

说明书

本发明涉及用于治疗和/或预防乙肝病毒感染的融合蛋白，其包含与至少一种由氨基酸序列组成的肽融合的至少一种乙肝病毒PreS多肽或其片段，所述氨基酸序列与选自SEQ ID No.1、SEQ ID No.2、SEQ ID No.3和SEQ ID No.4的序列具有至少80％的同一性。

本发明涉及用于治疗和/或预防乙肝病毒(HBV)感染的融合蛋白。

乙肝是由乙肝病毒引起的肝脏疾病。该疾病每年影响全世界数百万人。 HBV存在于感染者的血液和体液中，因此可以通过使这些液体与健康人的液体接触而传播。

HBV主要通过在肝细胞中复制来干扰肝脏的功能。在HBV感染期间，宿主免疫应答引起肝细胞损伤和病毒清除两者。

急性HBV感染通常得不到治疗，因为大多数人都能自发清除感染。然而，为了降低肝硬化和肝癌的风险，必须治疗慢性HBV感染。目前用于治疗HBV 感染的抗病毒药物包括拉米夫定、阿德福韦、替诺福韦(tenofovir)、替比夫定(telbivudine)和恩替卡韦。此外，作为免疫系统调节剂的干扰素α-2a也可用于治疗。但是，这些药物都不能清除HBV感染。这些药物只能阻止HBV复制，从而使肝损伤最小化。

本发明的目的是提供治疗和/或预防HBV感染的新方法，其克服了当前 HBV治疗的缺点。一个特别重要的目标是通过恢复有效的体液和细胞免疫应答来对慢性感染患者中的HBV进行病毒清除。

这些目的通过用于治疗和/或预防乙肝病毒感染的融合蛋白来实现，所述融合蛋白包含与至少一种由氨基酸序列组成的肽融合的至少一种乙肝病毒 PreS多肽或其片段，所述氨基酸序列与选自SEQ ID No.1、SEQ ID No.2、SEQ ID No.3和SEQ ID No.4的序列具有至少80％同一性。

令人惊讶地证明，包含乙肝病毒PreS多肽或其片段和至少一种由氨基酸序列组成的融合蛋白与单独的PreS或包含与SEQ ID No.1，SEQ ID No.2，SEQ ID No.3和SEQ IDNo.4不同的肽的其它融合蛋白相比以高得多的程度诱导个体中PreS特异性抗体的形成。此外，响应施用本发明的融合蛋白而产生的抗体显示出优异的乙肝中和作用并且能够抑制乙肝病毒感染。第一次发现，包含PreS的融合蛋白的施用可以成功地用于治疗和/或预防人类受试者中的乙肝病毒感染。

如图2B所示，本发明的融合蛋白的施用导致形成抗体，所述抗体特异性针对HBVPreS的前30个(肽P1)和50个(肽P2)氨基酸残基，在更低程度上针对 HBV PreS的C末端区域(肽P6到P8)以及在忽略不计的程度上针对中心部分 (肽P4和P5)。由于HBV PreS的N端部分已知在HBV的肝细胞附着和HBV感染中起重要作用，针对PreS多肽的这部分的抗体在治疗和/或预防HBV感染中特别有用。与此相反，仅施用HBV PreS不显示这些效果。由此产生的抗体能够结合HBV PreS的几乎任何部分(参见图2A)。这显示由本发明的融合蛋白诱导的免疫应答更集中于涉及HBV感染的HBV PreS多肽的那些部分。

本发明的融合蛋白可以包含一种或多种乙肝病毒PreS蛋白多肽或其一种或多种片段。融合蛋白中超过一种乙肝病毒PreS多肽或其片段的存在具有以下优点：向免疫系统呈递更多抗原，允许形成甚至更多针对PreS的抗体。在本发明的特别优选的实施方案中，融合蛋白包含1、2、3、4、5、6、7、8、 9或10种乙肝病毒PreS多肽或其片段。如本文定义为本发明融合蛋白的一部分的HBV PreS多肽以及它们的片段可以源自相同的HBV基因型或不同的基因型。例如，本发明的融合蛋白可以仅包含HBV基因型A的PreS多肽或其片段，或者可以与源自HBV基因型B、C、D、E、F或F、G或H的其它PreS多肽或其片段组合。