[发明专利]半胱氨酸蛋白酶

说明书

技术领域

本发明涉及显示IgG半胱氨酸蛋白酶活性的新型多肽及其活体内和活体外用途。该多肽的用途包括用于预防或治疗由IgG介导的疾病和病症的方法，以及用于分析IgG的方法。

背景技术

IdeS(化脓性链球菌的免疫球蛋白G降解酶，Immunoglobulin G-degrading enzyme of S.pyogenes)是由人类病原体化脓性链球菌生成的细胞外半胱氨酸蛋白酶。IdeS最初是从血清型M1的A群链球菌菌株分离的，但现在已经在所有测试的A群链球菌菌株中识别到了ides基因。IdeS具有非常高程度的底物特异性，同时其唯一识别的底物是IgG。IdeS催化人IgG所有亚类重链的下铰链区中的单次蛋白水解切割。IdeS还催化各种动物中IgG的一些亚类的重链的等效切割。IdeS通过两阶段机制有效地将IgG切割至Fc和F(ab′)₂片段。在第一阶段中，将一个(第一)IgG重链切割以产生具有非共价结合的Fc分子的单切割的IgG(scIgG)分子。scIgG分子实际上是保留原始IgG分子的剩余(第二)重链的中间产物。在该机制的第二阶段中，该第二重链被IdeS切割以释放F(ab′)₂片段和同二聚体Fc片段。这些是在生理条件下通常观察到的产物。在还原条件下，F(ab′)₂片段可以解离成两个Fab片段，并且同二聚体Fc可以解离成其组分单体。

发明内容

已经显示IdeS的IgG切割能力具有活体外实用性，例如在用于生产Fab和Fc片段的方法中，可用于分析IgG。参见例如，WO2003051914和WO2009033670。还已经显示IdeS具有作为治疗剂的活体内实用性，因为它能够在活体内切割介导疾病的或者其他方面不需要的IgG分子。参见例如，WO2003051914、WO2006131347和WO2013110946。IdeS可用作针对任何完全地或部分地由IgG介导的疾病或病症的治疗。许多自身免疫疾病完全地或部分地由IgG介导，捐赠器官的急性排斥反应正是如此。

然而，IdeS是免疫原性蛋白。也就是说，当IdeS用作治疗剂时，接受IdeS的受试者的免疫系统将经常对其进行应答。免疫系统对IdeS的反应将通常涉及对IdeS特异性的抗体的产生。这些抗体在本文中可称为对IdeS特异性的抗药物抗体(ADA)或“IdeS特异性ADA”。一般来说，对IdeS的免疫应答(特别是IdeS特异性ADA的产生)可能会引起两种相关类型的问题。首先，可能减少IdeS的效力，例如由于ADA结合，可能需要较高或重复剂量来达到相同的效果。具有这种效果的ADA可以被称为“中和ADA”。其次，可能存在不想要的或甚至有害的并发症，诸如由ADA与IdeS的免疫复合物触发的高度炎症应答。在给定的受试者中对IdeS特异性的ADA数量越高，则这些问题的可能性就越大。患者中IdeS特异性ADA分子的存在和数量可以通过任何合适的方法(诸如试剂特异性CAP FEIA(ImmunoCAP)测试或对来自患者的血清样品进行的滴度测定)来测定。高于临床医生确定的阈值，患者中IdeS特异性ADA分子的数量可能妨碍了IdeS的施用，或表明需要更高剂量的IdeS。这样较高的剂量可进而导致患者中IdeS特异性ADA分子的数量增加，从而妨碍了IdeS的进一步施用。