[发明专利]多孔傅立叶重叠关联和荧光成像

权利要求书

1.一种用于明视场傅立叶重叠关联成像和荧光成像的成像设备，所述成像设备包括：

第一荧光照明源，所述第一荧光照明源被配置成向透明孔提供第一波长范围的激发光；

光学系统，所述光学系统具有相对地定位的一对物镜；以及

图像传感器，所述图像传感器被配置成接收来自所述透明孔的通过所述光学系统传播的光，所述图像传感器还被配置成基于来自可变照明源的在不同照明角度处的顺序照明，获取穿过所述透明孔中的样品的光的一系列唯一地照亮的强度测量结果，所述图像传感器还被配置成基于由所述样品响应于所述第一波长范围的激发光而发射的光，获取所述样品的第一荧光图像；

其中，所述成像设备还校准所述可变照明源的光源的位置，包括：

将所述可变照明源的光源的位置校准到接收来自多孔板中的透明孔的光的图像传感器的位置；

点亮提供所述顺序照明的所述可变照明源的中心光元件；

从穿过在所述多孔板的透明孔中的样品的光获取强度图像；

确定所述强度图像的中心；

测量在所述强度图像中的偏移；

使用查找数据来找到所述中心光元件的位移；以及

基于中心光位移来确定多个照明角度。

2.根据权利要求1所述的成像设备，还包括处理器，所述处理器被配置成迭代地确定与所述一系列唯一地照亮的强度测量结果自相一致的、所述样品的分辨率经提高的明视场图像。

3.根据权利要求2所述的成像设备，其中，所述样品的所述分辨率经提高的明视场图像和所述第一荧光图像被定期地确定，以用于延时成像。

4.根据权利要求1所述的成像设备，其中，所述第一波长范围的激发光和顺序地在不同照明角度处的照明是在不同的图像获取时间提供的。

5.根据权利要求1所述的成像设备，其中，所述光学系统具有在所述物镜之间的发射滤光片，并且所述发射滤光片被配置成阻挡所述第一波长范围的激发光。

6.根据权利要求5所述的成像设备，其中，来自所述可变照明源的照明具有在所述发射滤光片的通频带内的波长范围。

7.根据权利要求2所述的成像设备，还包括第二荧光照明源，所述第二荧光照明源被配置成向所述透明孔提供第二波长范围的激发光；

其中，所述图像传感器还被配置成基于由所述样品响应于所述第二波长范围的激发光而发射的光，获取所述样品的第二荧光图像；

其中，所述处理器还被配置成将所述第一荧光图像和所述第二荧光图像组合，以生成所述样品的多色荧光图像。

8.根据权利要求7所述的成像设备，其中，所述光学系统具有在所述物镜之间的双频带发射滤光片，并且其中，所述双频带发射滤光片被配置成阻挡所述第一波长范围的激发光并且阻挡所述第二波长范围的激发光。

9.根据权利要求8所述的成像设备，其中，来自所述可变照明源的照明具有在所述双频带发射滤光片的通频带内的波长范围。

10.根据权利要求1所述的成像设备，其中，所述一对物镜包括第一物镜和第二物镜，其中，所述第一物镜被配置成收集来自所述透明孔的光，并且所述第二物镜被配置成将光聚焦到所述图像传感器，并且其中，所述第一物镜和所述第二物镜具有相同的数值孔径。

11.根据权利要求1所述的成像设备，其中，每个物镜具有小于0.55的数值孔径。

12.根据权利要求1所述的成像设备，其中，所述第一荧光照明源以与所述透明孔的底表面处的平面成小角度地引导所述第一波长范围的激发光并且引导至所述透明孔的中心。

13.根据权利要求1所述的成像设备，其中，所述透明孔在多孔板中。