[发明专利]日本栗2n花粉诱导方法及其应用

权利要求书

1.日本栗2n花粉诱导方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)选择诱导材料

选择日本栗品种的花序为诱导处理材料；

2)配制诱导药剂

于采用诱导药剂处理花序前2天配制好诱导药剂，置于4℃冰箱中备用；

3)诱导药剂浸渍花序

选择日本栗品种花枝上的花序为处理对象，诱导药剂处理花序时期为每年4月末；将选用的雄花枝上的每条花序单独用脱脂棉包好，保留花序着生部位叶片；之后用塑料条将雄花枝上所有包裹好脱脂棉的花序连同其着生部位叶片自下而上封好，留有适当透气缝隙；用医用一次性注射器将配置好的诱导药剂注射在包裹好花序的脱脂棉上，直至脱脂棉吸收诱导药剂至饱和状态，如此使日本栗雄花枝上的花序在药剂浸渍状态下；之后拆除塑料条，去除花序上的脱脂棉，将药剂处理后的花序重新暴露在空气中；

4)花序散粉前套袋

在日本栗花朵开放前，将诱导药剂处理过的花序全部套入硫酸纸袋中，封口，以防止该花序上混入其它花粉；

5)花粉收集

待硫酸纸袋中花序处于雄花盛花期，此时花粉已成熟，将硫酸纸袋和花序一同采下，带回室内室，置于阴凉干燥处24h，之后收集袋中自然散落的花粉，即获得大频率日本栗2n花粉。

2.根据权利要求1所述的日本栗2n花粉诱导方法，其特征在于，步骤1)所述日本栗品种为花序长、花朵多、花粉量充足的日本栗品种‘XY-1’，Castanea crenata。

3.根据权利要求1所述的日本栗2n花粉诱导方法，其特征在于，步骤1)所述花序为雄花枝上的花序。

4.根据权利要求1所述的日本栗2n花粉诱导方法，其特征在于，步骤2)所述诱导药剂包括W/V为0.5％的秋水仙素、V/V为0.1％的二甲基亚砜。

5.根据权利要求1所述的日本栗2n花粉诱导方法，其特征在于，步骤3)所述处理对象为日本栗品种‘XY-1’健康无病、生长健壮的雄花枝，其上保留的5个花序为处理对象。

6.根据权利要求1到4任一项所述的日本栗2n花粉诱导方法，其特征在于，步骤3)所述诱导药剂处理花序时期为每年4月末，以日本栗花序基部直径不超过3mm，长度不超过7cm，花朵之间未分离为标准。

7.根据权利要求1到4任一项所述的的日本栗2n花粉诱导方法，其特征在于，步骤3)所述用脱脂棉包好，棉层厚度1mm。

8.根据权利要求1到4任一项所述的日本栗2n花粉诱导方法，其特征在于，步骤3)所述使日本栗雄花枝上的花序在药剂浸渍状态下，保持72h。

9.根据权利要求1所述的日本栗2n花粉诱导方法的应用，其特征在于：该方法用于日本栗多倍体育种。