[发明专利]一种猪支气管败血波氏杆菌病疫苗

说明书

本发明的目的提供一种猪支气管败血波氏杆菌病单价灭活疫苗，其中抗原为灭活的YBB01株，其保藏编号为CCTCC M 2016606。本发明的猪支气管败血波氏杆菌YBB01株对猪的毒力强、免疫原性好，并具有较好的交叉保护性。其制备的疫苗安全性良好，未出现由疫苗引起的任何局部和全身不良反应。保存期试验中经过性状、安全性试验、效力试验数据的分析，各项指标均稳定有效。效力试验结果表明，该灭活疫苗免疫仔猪后抗体和攻毒保护率均较好，具有良好的保护性。

技术领域

本发明属于兽用生物制品技术领域，具体涉及一种猪支气管败血波氏杆菌病疫苗。

背景技术

猪支气管败血波氏杆菌病,又称波氏菌病,是一种重要的猪呼吸道系统疾病,以各种急慢性的呼吸道病症为特征,极易引起其它病原菌的混合和继发感染,全世界多数养猪业发达的国家均有此病发生,给养殖业带来了严重的经济损失。猪波氏杆菌病在全世界分布广泛,在欧洲、美国、加拿大、日本的感染率都很高,全世界已经有30％-50％的猪群受到波氏杆菌的感染。我国对猪波氏杆菌进行的流行学调查显示,我国多个省份和地区爆发严重,感染率高达61.1％。随着集约化程度的不断提高,对养猪业的危害也日趋严重。

发明内容

本发明的目的是提供一种猪支气管败血波氏杆菌病疫苗，从而弥补现有疫苗的不足。

本发明还提供一种灭活疫苗，其中抗原为灭活的猪支气管败血波氏杆菌YBB01株；

本发明所提供猪支气管败血波氏杆菌YBB01株(Bordetella bronchisepticaYBB01)，于2016年11月1日保藏在中国武汉、武汉大学的中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 2016606。

上述的灭活疫苗，抗原的灭活采用甲醛灭活；

本发明的灭活疫苗的制备方法如下：

1)油相：采用MONTANIDETM ISA 201 VG佐剂(以下简称201佐剂)；

2)水相制备：将纯粹检验合格的YBB01株抗原，将菌泥分别重悬于灭菌的生理盐水中，均稀释至4.0×10⁹CFU/ml灭活后，检验合格后，作为抗原；

3)乳化：将水相和油相预热至31℃，按质量比1:1混合，4000r/min搅拌30～40分钟；

4)分装：定量分装，加盖密封，并粘贴标签，置2～8℃保存。

本发明的疫苗所使用的猪支气管败血波氏杆菌YBB01株的毒力强高、免疫原性好并具有较好的交叉保护性。本发明制备的疫苗的安全性良好，未出现由疫苗引起的任何局部和全身不良反应。保存期试验中经过性状、安全性试验、效力试验数据的分析，各项指标均稳定有效；效力试验结果证明，YBB01株产生抗体快，重要的是免疫后能够抵御流行株的保护。

具体实施方式

申请人筛选获得了一株猪支气管波氏杆菌YBB01株，并用其制备疫苗，从而促成了本发明。

下面结合实施例对本发明进行详细的描述。

实施例1：猪支气管波氏杆菌YBB01株的筛选

1.流行病学调查 自2013年以来，发明人对猪支气管败血波氏杆菌的流行病学进行调查，并对部分猪场进行跟踪调查。调查结果发现，猪支气管败血波氏杆菌目前已在我国猪场广泛存在。

2.细菌分离 采集疑似病猪的肺脏、胸腹腔积液、心包积液等病料，接种TSA培养基，于5％CO₂条件下，37℃培养24～48h，挑取单个菌落，进行培养并鉴定。

3.细菌鉴定

3.1 形态观察 取疑似菌落，涂片后革兰氏染色镜检，观察其细菌形态。