[发明专利]防治柑橘树脚腐病的生物农药及其制备方法

权利要求书

1.一种防治柑橘树脚腐病的生物农药，其特征在于，由木霉菌发酵液、枯草芽孢杆菌发酵液、细黄连霉菌发酵液及中药提取物制备而成，所述中药提取物为金钱柳、花椒和马鞭草的提取物。

2.根据权利要求1所述的防治柑橘树脚腐病的生物农药，其特征在于，所述中药提取物为金钱柳、花椒和马鞭草的水提取物，所述金钱柳、花椒和马鞭草的重量比为1-2：1-2：1-2；所述中药提取物由下述制备方法制得：取花椒、马鞭草和金钱柳干品混合得中药混合物，加入中药混合物重量3-5倍的水浸泡1-3小时，90-100℃保持10-30分钟，自然冷却，过滤弃残渣，得滤液即为中药提取物。

3.根据权利要求2所述的防治柑橘树脚腐病的生物农药，其特征在于，所述生物农药由以下重量百分比的组份组成：

木霉菌发酵液200-300倍稀释液5％-10％；

枯草芽孢杆菌发酵液200-300倍稀释液10％-25％；

细黄连霉菌发酵液200-300倍稀释液10％-25％；

金钱柳、花椒和马鞭草的提取物3％-5％；

及余量的水。

4.根据权利要求3所述的防治柑橘树脚腐病的生物农药，其特征在于，所述生物农药由以下重量百分比的组份组成：

木霉菌发酵液200-300倍稀释液6％-8％；

枯草芽孢杆菌发酵液200-300倍稀释液15％-23％；

细黄连霉菌发酵液200-300倍稀释液12％-20％；

金钱柳、花椒和马鞭草的提取物3.5％-4.5％；

及余量的水。

5.根据权利要求4所述的防治柑橘树脚腐病的生物农药，其特征在于，所述生物农药由以下重量百分比的组份组成：

木霉菌发酵液200-300倍稀释液7％；

枯草芽孢杆菌发酵液200-300倍稀释液18％；

细黄连霉菌发酵液200-300倍稀释液15％；

金钱柳、花椒和马鞭草的提取物4％；

及余量的水。

6.根据权利要求3-5任一项所述的防治柑橘树脚腐病的生物农药，其特征在于，所述木霉菌发酵液、枯草芽孢杆菌发酵液、细黄连霉菌发酵液的制备方法为：取固体琼脂平板培养基，将木霉菌、枯草芽孢杆菌以及细黄连霉菌菌种分别接种于固体琼脂平板培养基，在25-35℃下培养30-80小时得菌落；分别取木霉菌、枯草芽孢杆菌以及细黄连霉菌的单菌落，接种于灭菌液体培养基内在25-35℃下在摇床中培养20-30小时，制成种子液；再分别将种子液接种到灭菌液体培养基内，25-35℃下在摇床中60-80小时得木霉菌发酵液、枯草芽孢杆菌发酵液、细黄连霉菌发酵液；所述种子液与液体培养基的重量份数比为l：8-20。

7.根据权利要求6所述的防治柑橘树脚腐病的生物农药，其特征在于，所述固体琼脂平板培养基按重量份计由以下组分制备而成：胰蛋白胨1-2份，酵母提取物0.5-1份，氯化钠0.5-1份，琼脂1-1.5份，水800-1000份；所述固体琼脂平板培养基pH为7-7.5。

8.根据权利要求7所述的防治柑橘树脚腐病的生物农药，其特征在于，所述固体琼脂平板培养基中的菌种接种量为0.001-0.005份。

9.根据权利要求6所述的防治柑橘树脚腐病的生物农药，其特征在于，所述液体培养基按重量份计由以下组分制备而成：淀粉10-30份，牛肉膏10-30份，蛋白胨10-30份，NaCl4-8份，水1000-3000份；所述液体培养基pH为7-7.5。

10.权利要求1所述防治柑橘树脚腐病的生物农药的制备方法，其特征在于，包括如下进行的步骤：

(1)分别取木霉菌发酵液、枯草芽孢杆菌发酵液、细黄连霉菌发酵液根据需要进行稀释得木霉菌发酵液稀释液、枯草芽孢杆菌发酵液稀释液、细黄连霉菌发酵液稀释液；

(2)取所需量的木霉菌发酵液稀释液，然后将所需量的枯草芽孢杆菌发酵液稀释液和细黄连霉菌发酵液稀释液加入到木霉菌发酵液稀释液中得到培养液A；

(3)将所需量的中药提取物加入所需量的水中，混合均匀，加热煮沸30-45min，自然冷却至室温得到培养液B；

(4)将培养液A和培养液B混合搅拌均匀后30℃-50℃放置48h以上，即得到防治柑橘树脚腐病的生物农药。