[发明专利]一种生产成本低的聚多巴胺复合油漆絮凝剂

权利要求书

1.一种生产成本低的聚多巴胺复合油漆絮凝剂，其特征在于，包括以下步骤：

（1）菌种分离纯化

将处理后期阶段的油漆废水装入无菌三角瓶中，置于4℃保存，将种子培养基于121℃下灭菌，冷却后取100μL废水接种到100ml的种子培养基中，于37℃恒温扩大培养24h，然后将培养液分别稀释到10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6倍，再将各个稀释后的菌悬液涂布于分离培养基上，37℃恒温培养24h，挑出形态好的菌落完成初步分离，再将挑选出的各个菌接种于种子培养基中，37℃恒温培养24h，对各个菌的培养液稀释并进行划线分离纯化，将最后得到的纯化单菌落保存在分离培养基上；

（2）菌种的筛选

将步骤（1）分离出来的菌分别用接种环接种于种子培养基中，在30℃，160r/min的条件下培养72h，用4g/L的高岭土悬浊液测试菌种的絮凝率，将絮凝率大于50%的菌种保留，并且进行多次传代，将筛选出的菌种保藏；

（3）菌种的发酵培养

a、将啤酒废水和制糖发酵废水分别在5000rpm下离心20min，去除悬浮杂质，其中制糖发酵废水总糖含量为19.85g/L，总氮含量为3263.3mg/L，啤酒废水总糖含量为196.1g/L，总氮含量为1796.8mg/L，然后按照总糖浓度7g/L，炭源和氮源比50:1进行稀释，并且添加磷酸二氢钠和磷酸氢二钠，其中磷酸二氢钠浓度为2g/L，磷酸氢二钠浓度为5g/L，再加入硫酸镁调节发酵培养基的pH为9，高压灭菌备用；

b、将步骤（2）中保藏在斜面的产生菌菌种接种到发酵培养基中，在30℃、150r/min恒温振荡器上培养3h，使各菌株均处于对数生长期，制成菌种悬浮液，按照5-10%的接种量接种到100ml步骤a制备的发酵培养基中，在30℃、转速为160r/min条件下培养72h；

c、将步骤b制得的发酵液置于4℃高速冷冻离心机上于8000r/min离心30-40min，将得到的上清液中加入2倍量的无水乙醇在4℃下静置24h，然后继续在4℃条件下于8000r/min离心30-40min，将得到的沉淀用无水乙醇反复洗涤，置于透析袋中透析48h，冷冻干燥后得微生物絮凝剂；

(4)复合磁性微球的制备

d、将六水合氯化铁和四水合氯化亚铁按照三价铁和二价铁摩尔比1：1混合，电动搅拌使其充分混匀，在30℃时边搅拌边缓慢滴加1mol/L的氢氧化钠直至溶液的pH为11，加热使其反应温度控制在60℃，然后逐滴加入油酸搅拌反应1-1.5h，反应结束后冷却至室温，然后用蒸馏水反复洗涤呈中性，真空干燥后磨碎备用；

e、将三（羟甲基）氨基甲烷加到盐酸溶液中制成10mmol/L的浓度，pH调节成8-8.5，按照固液比2:5加入步骤d制备的产物，超声分散30-45min后加入加入步骤c制备的微生物絮凝剂继续超声分散，再将多巴胺用盐酸稀释制成2mg/ml的多巴胺盐酸溶液，然后将多巴胺盐酸溶液加到上述混合溶液中于常温下搅拌3-4h，反应完成后，对产品进行磁分离，用无水乙醇洗涤数次，在真空干燥箱中于40℃下干燥7-8h即可。

2.根据权利要求1所述一种生产成本低的聚多巴胺复合油漆絮凝剂，其特征在于，所述的分离培养基的配方配比为：牛肉膏3-4g/L、蛋白胨10-12g/L、氯化钠5-6g/L、琼脂15-20g/L、加蒸馏水至1000ml；调节pH值至7.0-7.2，于121℃灭菌20min；种子培养基配方比为：牛肉膏3-4g/L、蛋白胨10-13g/L、氯化钠5-7g/L、加蒸馏水至1000ml，调节pH值至7-7.2，于121℃灭菌20min。

3.根据权利要求1所述一种生产成本低的聚多巴胺复合油漆絮凝剂，其特征在于，所述步骤（4）中各原料按照重量份配比为：六水合氯化铁6.8-7.4、油酸0.2-0.3、微生物絮凝剂1.8-2.2、多巴胺3.2-3.6、三（羟甲基）氨基甲烷适量、四水合氯化亚铁适量、1mol/L氢氧化钠适量、盐酸适量、无水乙醇适量、蒸馏水适量。