[发明专利]基于纳米银催化的比色和电化学双通道核酸适配体传感器有效
申请号: | 201611107216.3 | 申请日: | 2016-12-06 |
公开(公告)号: | CN108152349B | 公开(公告)日: | 2023-07-25 |
发明(设计)人: | 宋伟;朱超云;赖庆菁 | 申请(专利权)人: | 南京科技职业学院 |
主分类号: | G01N27/327 | 分类号: | G01N27/327;G01N33/68 |
代理公司: | 南京北辰联和知识产权代理有限公司 32350 | 代理人: | 何美琴 |
地址: | 210048 江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 纳米 催化 比色 电化学 双通道 核酸 适配体 传感器 | ||
1.基于纳米银催化的比色和电化学双通道核酸适配体传感器,实现对PDGF-BB的测定,其特征在于:将PDGF-BB核酸适配体固定在多孔酶标板孔中,加入靶标PDGF-BB,形成适配体与蛋白的复合物后加入PDGF-BB核酸适配体修饰的纳米银探针;加入探针反应后加入反应底物;纳米银催化反应完成后实现双通道检测;通道1采用分光光度法,在最大吸收波长下检测底物体系吸光度,利用比色法读取吸光度值可测定样品含量;通道2采用电化学检测方法,可直接向孔中加入还原态氧化石墨烯作为电解质,将印刷电极插入其中进行电沉积,完成后将电极置于电解质溶液,检测电极表面形成的纳米复合物的放大的电化学信号,实现靶标的定量测定;
纳米银可以催化硼氢化钠和邻硝基苯酚之间的反应,其中,硼氢化钠和邻硝基苯酚的体积比为1:1,硼氢化钠的摩尔浓度为50mmol/L,邻硝基苯酚的摩尔浓度为200mmol/L;在纳米银的催化作用下,硼氢化钠将黄色的邻硝基苯酚还原成无色的邻氨基苯酚;
直接向催化反应完成后的各孔中加入2mg/mL还原态氧化石墨烯作为电解质,将印刷电极插入其中进行电沉积,用循环伏安法在-0.3V至1.3V范围内扫描20圈;完成后检测电极表面形成的纳米复合物的放大的电化学信号,以0.1mol/L的盐酸溶液为电解质,记录-0.3V至0.4V范围内示差脉冲伏安曲线,检测信号为峰电流值,以标准曲线法对PDGF-BB的进行定量测定。
2.如权利要求1所述的传感器,其特征在于:用波长为423nm的可见分光光度计分别读取PDGF-BB标准品和试样反应孔中的溶液的吸光度值,并分别计算标准品孔与空白样品孔吸光度值之间的差值⊿A标准;试样孔与空白样品孔吸光度值之间的差值⊿A试样;采用直接比较的方法可计算出试样中PDGF-BB的含量。
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