[发明专利]一种适用于中草药千里香种苗的组织培养方法

说明书

本发明公开了一种适用于中草药千里香种苗的组织培养方法，主要为将千里香的种子或顶芽或腋芽在萌发培养基上培养长出萌发小苗，接种在丛生芽诱导培养基上繁殖并经扩培继代培养，长出丛生芽和不定芽后得到无根苗，然后将无根苗进行不定根诱导培养，经炼苗后再移栽培植即可。本发明的培养基分别为萌发培养基在MS上加6‑BA和NAA或GA；丛生芽诱导培养基在MS上加6‑BA和NAA和TDZ，不定根诱导培养基在MS上加6‑BA、NAA和IBAK。本发明中草药千里香不定芽叶片肥厚，茎干粗大，具有变异率低，增殖系数高的优点，炼苗成活率达到90％以上，适用于提供中草药千里香的种苗，成本低，污染小，四季可生产，适合大规模育苗。

技术领域

本发明属于植物繁殖技术领域，尤其涉及一种适用于中草药千里香种苗的组织培养方法。

背景技术

千里香(Murraya paniculata(L.)Jack.，)又名：万里香、九秋香、九树香，为芸香科九里香属植物的小乔木，其根、干燥叶及带叶嫩枝用作草药，千里香药材使用广泛，是2010年版《中国药典》收载的九里香品种之一，主要分布于广西、云南、贵州等地。具有行气活血，散瘀止痛，解毒消肿的功效，主治胃脘疼痛、风湿痹痛、跌打肿痛、疮痈、蛇虫咬伤；亦用于麻醉止痛。千里香中主要含香豆精、黄酮、挥发油等成分，经研究发现其黄酮类成分含量较高。我国于20世纪60年代初开始利用中草药千里香资源研发治疗各种疼痛的药物。

目前国内市场上千里香药材原料90％以上来自广西，它是“三九胃泰颗粒”和国内妇科名牌产品“肤阴洁复方黄松洗液、湿巾”等多种中成药的主要原料药材。因为千里香雄蕊退化严重，产生种子量极少，种子繁殖率极低。野生资源年产量远不能满足市场需求，也面临着野生资源濒于枯竭的境况。因此，采用人工繁殖育苗的方法对保护野生千里香资源和满足规模化生产的需要显得十分必要。千里香树浑身是宝，除了千里香的根茎叶药用价值外，其树型优美还可以作为园艺树种，千里香还是大石山区石漠化治理和林业生产的经济价值极高的树种。然而，千里香育苗是抑制中草药千里香产业的瓶颈，因千里香属扦插极难生根树种之一，普通扦插不能生根和种子萌发率低等问题限制了其应用推广。

目前，中草药千里香的种植栽培主要是采用种子实生苗进行育苗，由于结实极少，种子萌发率低，生长周期长，占地面积大，难以实现高效快速的大规模工业化种植栽培。

发明内容

本发明的目的在于：针对上述存在的问题，提供一种适用于中草药千里香种苗的组织培养方法，本培养方法包括丛生芽诱导培养和不定根诱导培养，并经过数轮继代培养后，芽生长正常，炼苗成活率达到90％以上，可以显著提高千里香的种苗存活率；并可以解决现有中草药千里香种子实生苗不能高效快速的大规模工业化种植栽培的问题。

为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下：

一种适用于中草药千里香种苗的组织培养方法，包括胚、芽预处理、丛生芽诱导培养、不定根诱导培养以及移栽培植；所述组织培养方法的具体步骤为：

(1)预处理：将千里香的种子、顶芽或腋芽，经过无菌处理后接种在盛放有萌发培养基的试管或培养瓶中进行萌发培养，每试管或培养瓶中接种一颗种子或顶芽或腋芽，然后置于培养室中；

(2)丛生芽诱导培养：将萌发培养基中培养得到的萌发小苗转入盛放有丛生芽诱导培养基中进行培养，5-6周后进行扩培继代培养，得到无根苗；

(3)不定根诱导培养：将无根苗转入不定根诱导培养基，培养5-7周；

(4)移栽培植：将不定根诱导培养得到的根长为0.4-1.5cm的种苗经炼苗后移栽至泥炭+细沙或珍珠岩混合基质中，在温度16-25℃，湿度60-70％，自然光照的条件下培养3-5周，待植株发育3-5张功能叶后，将其植入室外大田种植即可。