[发明专利]一种果胶为壁材的生物微球制备方法及应用在审
| 申请号： | 201611011383.8 | 申请日： | 2016-11-17 |
| 公开（公告）号： | CN108066314A | 公开（公告）日： | 2018-05-25 |
| 发明（设计）人： | 赵姗;孙广炜;张英;刘洋 | 申请（专利权）人： | 中国科学院大连化学物理研究所 |
| 主分类号： | A61K9/50 | 分类号： | A61K9/50;A61K47/36;A61K38/28;A61P3/10;A61K35/747;A61P37/02;A61P35/00;A61L24/08;A61L24/10;C12N11/10;C12N11/04;C07K17/10;C07K17/04 |
| 代理公司： | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人： | 马驰 |
| 地址： | 116023 *** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 壁材 生物微球 微球 活性物质 制备工艺 细胞 果胶 制备 应用 生物活性物质 蛋白药物 绿色环保 其他生物 三维模型 细胞活性 包封率 高活性 固化液 包封 包埋 多肽 构建 可用 体外 固化 蛋白 传递 | ||
1.一种果胶为壁材的生物微球制备方法，其特征在于：依次包括如下步骤：
(1)将果胶粉末溶于pH为5.5～7.4的生理盐水中，搅拌溶解，无菌过滤；
(2)将需要被包封细胞和/或其他生物活性物质加入步骤(1)制得的果胶溶液中，形成混合悬液；
(3)使用注射器泵将步骤(2)中制得的混合悬液逐滴加入固化液中，固化20-30分钟；
(4)弃去(3)中固化液，收集得到载有细胞和/或活性物质的微球。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤(1)果胶为来源于苹果、柑橘、火龙果、银杏外种皮、柚子等中的一种或二种以上高等植物细胞壁的提取物，其分子量在40kDa～400kDa，酯化度DE为50％以下。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤(2)混合悬液中细胞密度为5×10
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤(3)中注射器泵速为0.5～3ml/min，注射器容积为5～20mL，针头为19～24#，针头与固化液液面高度差为10～15cm。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤(2)中固化液为二价金属钙盐、钡盐或锌盐等中的一种或二种以上的水溶液，浓度为280～320mmol/L。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤(3)中固化温度为20～25度条件，固化液与果胶溶液的体积比例为：1:2～1:20。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：微球适用于细胞，蛋白药物或多肽等生物活性物质的包埋和/或培养。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：所述的细胞为人或哺乳动物来源的肝细胞、肾上腺髓质细胞、甲状腺细胞等生物活性物质功能细胞，各种细胞系细胞：如HepG2细胞、C3A细胞、MCF-7细胞等，以及干细胞或干细胞分化的各种细胞中的一种或二种以上；
所述蛋白药物多及肽包括：胰岛素、干扰素、单克隆抗体、生长因子等中的一种或二种以上。
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