[发明专利]一种定量检测化合物的测试条及侧向免疫层析的检测方法

说明书

本发明揭露一种定量检测化合物的测试条，其包括一层NC膜、位于所述NC膜前端上的一层样品垫、位于所述样品垫内侧的一层标记物垫、位于所述标记物垫后方的的检测区及与位于所述检测区后方第一控制区，位于所述第一控制区后方还设置有第二控制区，所述标记物垫含有待检测化合物的单克隆抗体偶联上Eu微球以及偶联上Eu微球的第一种抗体，所述检测区含有第二种抗体或待检测化合物的抗原，所述第一控制区含有第三种抗体，所述第二控制区含有与所述检测化合物、第二种抗体、第三种抗体不相互反应的第四种抗体，所述第四种抗体只与所述第一种抗体相互反应。相比现有技术，可以提高检测化合物的检测精密度。

技术领域

本发明涉及医疗检测领域，尤其涉及一种定量检测化合物的测试条及侧向免疫层析的检测方法。

背景技术

现有的侧向免疫荧光层析的方法来检测抗原或抗体，基本原理有两种：一种是双抗体(或双抗原)夹心法，将针对被检抗原(大分子)单抗划在T线位置，将另一个单抗偶联Eu微球，放在标记物垫上，C线划羊抗鼠的抗体。当含有被检抗原的样本加到样品垫上，被检抗原和标记垫中的标记抗体结合，层析到T线与这里的抗体形成抗体-抗原-标记抗体的复合物，停留在T线位置。如果样本中被检抗原的含量愈高，在T线除形成的复合物愈多，经过激发后产生的荧光强度愈高，利用浓度和荧光强度的正相关可以定量计算除被检抗原的浓度。

另一种是竞争法：具体的方法是将小分子的化合物，利用其表面的化学基团，通过化学偶联，连接到分子量大的蛋白分子上，如BSA,KLH等，形成小分子-载体蛋白的复合物，保留小分子的抗原性，同时提高抗原的免疫原性。将这样进行改造后的小分子-载体蛋白复合物直接包被在NC膜的T线(检测线)位置，将羊抗鼠IgG抗体包被在C线(控制线)的位置，作为对照，将单抗标记好荧光微球涂在标记物垫上。检测样品从样品垫加入，当样品中的不含有被检测的小分子，它就将标记物垫上的标记抗体洗出，到T线位置和这里的抗原结合，从而形成抗原-抗体的复合物，在激发光的作用下发出高强度的荧光，多余的抗体被C线的抗体结合。反之，如果样本中含有被检测的小分子，它直接和标记物垫中的标记抗体结合，形成了抗原-抗体复合物，使标记物垫中的标记抗体和T线的抗原结合减少，如果样本中的被检测的小分子的含量越高，T线的抗原结合到的标记抗体越少，激发后产生的荧光强度越低。这样形成一个样本中被检测物浓度越高，检测荧光结果越低的负相关结果，或与荧光检测结果的倒数呈正相关的结果。无论以上任何模式是在NC膜是有二条线，分别是用于检测的T线，用于判断实验是否成立的C线。例如中国专利申请号为第CN201310391061.0号专利揭露的检测方法，这种方法对于传统的免疫检测是合适的，但是在实际的检测过程中发现，这样的检测方式最大的问题是产品的批内差异比较大，基本在15％左右，最好的在10％左右，其检测的精度性未达到最大。

因此，有必要提出新的一种定量检测化合物的测试条及侧向免疫层析的检测方法来解决上述问题。

发明内容

针对现有技术中存在的上述问题，本发明的目的在于提供一种提高批内差异性控制性能的定量检测化合物的测试条及侧向免疫层析的检测方法。

为实现上述上述目的，本发明提供一种定量检测化合物的测试条，其包括一层NC膜、位于所述NC膜前端上的一层样品垫、位于所述样品垫内侧的一层标记物垫、位于所述标记物垫后方的检测区及与位于所述检测区后方第一控制区，位于所述第一控制区后方还设置有第二控制区，所述标记物垫含有待检测化合物的单克隆抗体偶联上Eu微球以及偶联上Eu微球的第一种抗体，所述检测区含有第二种抗体或待检测化合物的抗原，所述第一控制区含有第三种抗体，所述第二控制区含有与所述检测化合物、第二种抗体、第三种抗体不相互反应的第四种抗体，所述第四种抗体只与所述第一种抗体相互反应。

具体的，所述第一种抗体为兔抗体IgG或马抗体IgG，或豚鼠抗体IgG中的任意一种，所述第二种抗体为小鼠单抗，所述第三种抗体为羊抗鼠的抗体，所述第四种为选取羊抗兔的抗体，或羊抗马抗体，或羊抗豚鼠抗体中与第一抗体相对应的一种。