[发明专利]一种2,4-二甲基苯硫酚有关物质的检测方法

说明书

本发明提供一种2,4‑二甲基苯硫酚有关物质的高效液相色谱检测方法。所用液相色谱测定条件为：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填料，流动相为含有阳离子对的磷酸盐缓冲液‑甲醇。该方法具有方法简单便捷，专属性好，灵敏度高，重复性好等优点，适合于2,4‑二甲基苯硫酚中有关物质的定性和定量检测。

技术领域

本发明涉及检测方法，具体涉及一种用高效液相色谱分离分析2,4-二甲基苯硫酚有关物质的方法。

背景技术

2，4-二甲基苯硫酚，又名2，4-二甲基苯硫醇，为一种常用的医药中间体，其结构式如下：

分子式：C8H10S，分子量：138.23。

2,4-二甲基苯硫酚最常用于合成抗抑郁药物—沃替西汀，根据2,4-二甲基苯硫酚的工艺路线，可能存在的杂质有3-甲基苯硫酚、4-甲基苯硫酚、2,5-二甲基苯硫酚、3,4-二甲基苯硫酚、3,5-二甲基苯硫酚、2,6-二甲基苯硫酚。这些杂质的存在将产生一系列的副反应，最终大大影响产物的纯度，后续将需要繁复的工艺进行分离纯化。如文献1：Stability-indicating reversed-phase HPLC method development and characterization ofimpurities in vortioxetine utilizing LC-MS,IR and NMR(Lei Liu et al.，Journalof Pharmaceutical and Biomedical Analysis,117:325-332,2015)公开了合成沃替西汀的4种路线中涉及的杂质及副产物，合成路线如下：

从上述路线可以看出，路线1-3均采用2,4-二甲基苯硫酚为中间体合成沃替西汀，其中路线3的2，4二甲基苯硫酚(SMB)由于可能存在杂质2，6二甲基苯硫酚(SMB-1)使得产物中杂质Imp-E产生。因此文献1通过高效液相色谱法来测定产物沃替西汀中的各杂质(A-H)，以此推测原料中可能存在的杂质及产生的副反应。

然而，文献1仅能反映原料中可能含有的杂质，并没有提供一种直接对原料中的杂质加以控制的方法，而现有技术也没有公开适合于分析检测2,4-二甲基苯硫酚有关物质的方法。为了减少副反应的发生，提高产物收率和纯度，避免后续繁复的分离纯化过程，有必要对2,4-二甲基苯硫酚原料进行质量控制。

色谱法由于方法简便、快速，灵敏度高，可以同时反映化学组成及含量情况等特点，已经成为应用范围最广，最主要的方法之一。常用的色谱法有高效液相色谱法(HPLC)和气相色谱法(GC)等。考虑到2,4-二甲基苯硫酚分子量较小，且具有一定的挥发性，本申请的发明人也尝试采用气相色谱法，以OP-WAX和DB-FFAP为色谱柱对2,4-二甲基苯硫酚有关物质进行检测，然而分离效果并不理想。因此，本发明将提供一种适合于分离检测2,4-二甲基苯硫酚有关物质的高效液相色谱分析方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种分离分析2,4-二甲基苯硫酚有关物质的高效液相色谱法，从而实现对2,4-二甲基苯硫酚的质量控制。

发明人通过多次试验，最终确定采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，有机相与水相的混合溶液作为流动相，其中，有机相选自甲醇，水相选自磷酸盐缓冲液，水相中含有阳离子对试剂，以对2,4二甲基苯硫酚及其有关物质进行效分离。

发明人曾尝试以乙腈作为有机相，然而实验发现乙腈-缓冲液体系不能完全检测出每一个峰。发明人也尝试以甲醇-水作为流动相，采用等度洗脱或梯度洗脱的方式进行分离分析，然而采用梯度洗脱时，由于2,4-二甲基苯硫酚与其有关物质性质非常相似，使得2,4-二甲基苯硫酚色谱法与其相邻杂质峰并不能有效分离。而采用等度洗脱，在60min内仅能分离检测出2个色谱峰，保留时间过长，不利于检测。