[发明专利]一种可调控亚甲基蓝单体释放速度的羟基磷灰石/单宁酸复合颗粒的制备方法

说明书

本发明提供一种可调控亚甲基蓝单体释放速度的的羟基磷灰石/单宁酸复合颗粒的制备方法，即在含柠檬酸和氢氧化钙的水溶液中逐滴加入磷酸溶液，当pH值降至10时停止滴加，静置后用氯化铵溶液洗涤，再在分离得到的胶体溶液中加入亚甲基蓝后配成含亚甲基蓝的羟基磷灰石胶体溶液；在含单宁酸的溶液中加入含亚甲基蓝的羟基磷灰石胶体溶液，搅拌5分钟后，再加入含氯化铁的水溶液，搅拌反应5分钟后分离、干燥，即得到含亚甲基蓝的羟基磷灰石/单宁酸复合颗粒。本方法工艺简单、原料价格低，易于工业化生产。本方法制备得到的颗粒生物相容性好，易降解。亚甲基蓝主要以单体分子的形式自颗粒内部释放至溶液中，释放行为可方便调控。

技术领域

本发明提供一种可调控亚甲基蓝单体释放速度的羟基磷灰石/单宁酸复合颗粒的制备方法，属于化工原料生产技术领域。

背景技术

在溶液条件下，亚甲基蓝分子很难以单体形式存在，因为溶液中会有二聚体的形式存在，尤其是为了实现治疗效果而采用较高浓度剂量时，单体往往会聚集成二聚体分子，对其光化学治疗效果、氧化还原性能和细胞膜跨越能力等性能有显著影响，进而影响亚甲基蓝的治疗效果，也影响亚甲基蓝的光化学反应效率和荧光性能。另外，由于亚甲基蓝单体在体内被还原的能力非常强，极易被排出体外，体内循环时间短，因此到达病变组织的亚甲基蓝单体的数量较少，这就需要药物载体对亚甲基蓝进行吸附以调控亚甲基蓝自载体内的释放行为，例如缓慢释放、快速释放和pH值敏感释放等。

研究人员（S. Zhang, Z. Chu, C. Yin, C. Zhang, G. Lin, Q. Li, J. Am.Chem. Soc. 2013, 135, 5709-5716）采用在药物载体内包裹亚甲基蓝分子的方式，能保障亚甲基蓝分子的持续释放，延长体内存在时间，但在溶液中亚甲基蓝的释放速度过慢，且主要以二聚体的形式存在，当需要快速释放亚甲基蓝时需要加大服药量，但载体二氧化硅的生物相容性尚需要大幅度提高。与人体硬组织无机成分类似的磷酸钙，例如羟基磷灰石、磷酸八钙和二水合磷酸氢钙等生物相容性良好，降解产物为体内友好离子，但这些颗粒在溶液中主要带正电荷，与亚甲基蓝（水溶液中带正电荷）的吸附作用很弱，易造成亚甲基蓝吸附量过低的问题，因为在制备药物颗粒和服用过程中溶液就能将吸附的亚甲基蓝轻易洗掉。可见，亚甲基蓝自载体内部初期快速释放、中后期缓慢释放并且主要以单体形式存在的相关研究需要开展，毕竟快速释放亚甲基蓝单体的药物制剂在需要快速实现药物疗效的场合中有非常迫切的需求，然而到目前为止，相关研究尚未见报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种可调控亚甲基蓝单体释放速度的羟基磷灰石/单宁酸复合颗粒的制备方法，为实现上述目的，本发明所采用的技术方案步骤如下：

（1）配制含柠檬酸和氢氧化钙的水溶液，搅拌得到均匀的悬浮液后将含磷酸的水溶液逐滴加入，当悬浮液的pH值降至10时停止滴加，静置18小时后用质量分数为4%的氯化铵水溶液洗涤，将离心分离得到的羟基磷灰石胶体溶液中加入亚甲基蓝，搅拌2小时后制得含亚甲基蓝的羟基磷灰石胶体溶液；

（2）在含单宁酸的水溶液中，加入步骤（1）制备得到的含亚甲基蓝的羟基磷灰石胶体溶液，搅拌反应5分钟后再加入含氯化铁的水溶液，搅拌反应5分钟；

（3）将步骤（2）得到的反应溶液离心，并用乙醇洗涤沉降物后在60ºC下干燥12小时，即得到含亚甲基蓝的羟基磷灰石/单宁酸复合颗粒。

其中，步骤（1）中柠檬酸与氢氧化钙的摩尔比为0.07~0.21：1，最佳的是0.14:1。将含磷酸的水溶液滴加到悬浮液中，直到溶液的pH值降至10时停止，以确保所制备得到的胶体是羟基磷灰石。步骤（1）中加入亚甲基蓝，使亚甲基蓝的浓度为0.5~2毫克每毫升，最佳的为0.5毫克每毫升。亚甲基蓝和柠檬酸的浓度可以调控羟基磷灰石表面吸附的亚甲基蓝的数量。