[发明专利]一种检测乙肝病毒的试剂盒

说明书

【技术领域】

本发明涉及体外诊断检测技术领域，特别是涉及一种检测乙肝病毒的试剂盒。

【背景技术】

乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)感染是导致肝硬化和干细胞癌的主要原因之一，受HBV慢性感染的人群罹患原发性肝细胞癌的相对危险性至少增加300倍。全世界约有3亿人感染乙型肝炎病毒，而中国作为乙型肝炎的高流行区，就有约1.2亿人感染乙型肝炎病毒，因此对人群的HBV感染标志物的检测和筛查尤为重要。

临床上应用较多的检测乙肝病毒的试剂盒主要有酶联免疫分析法、化学发光免疫分析法和时间分辨免疫荧光分析法。但是现有的定量分析两种以上的分析物的试剂盒都操作比较繁琐，且价格也比较高。

鉴于此，克服该现有技术所存在的缺陷是本技术领域亟待解决的问题。

【发明内容】

本发明要解决的技术问题是提供一种定量检测两种以上的分析物，且操作简便、价格低廉的检测乙肝病毒的试剂盒。

本发明采用如下技术方案：

本发明提供了一种检测乙肝病毒的试剂盒，该检测乙肝病毒的试剂盒包括：包被的微孔反应板、铕标记的AFP标记抗体、钐标记的HBsAg标记抗体、分析缓冲液、荧光增强液、浓缩清洗液。

优选地，包被的微孔反应板的制作过程为：

用包被液将捕获抗体AFP和HBsAg稀释，获得稀释液；

将稀释液加入微孔反应板中，对该微孔反应板进行震荡、去除包被液、洗涤、干燥，并加入封闭液封闭一段时间后，去除封闭液，真空抽干后冷藏。

优选地，包被液为Tris-HCl缓冲液。

优选地，封闭液为50ml/L Tris-HCl缓冲体系中加入0.1％BSA、4％海藻糖、0.05％NaN₃，0.22μm过滤后调PH值至7.2于4℃保存。

优选地，铕标记的AFP标记抗体、钐标记的HBsAg标记抗体的制备方法为：

将AFP抗体或者ABsAg抗体加入带滤膜的离心管；

在离心管内加入标记缓冲液，离心后，去除滤液；

重复上一步骤两次以上，以获得浓缩的抗体原料；

按照质量比AFP抗体/Eu＝5:1或者HBsAg抗体/Sm＝2:1向离心管加入一定量的螯合物配体，以获得铕标记的AFP标记抗体或者钐标记的HBsAg标记抗体，密封后静置；

将离心管内的铕标记的AFP标记抗体或者钐标记的HBsAg标记抗体纯化、收集后加入保护液，密封冷藏。

优选地，标记缓冲液为Na₂CO₃溶液被过滤并调整PH值至9.0获得。

优选地，保护液为0.1％的BSA溶液。

优选地，螯合物配体为β-NTA螯合物。

优选地，分析缓冲液是由Tween-40、NaCl、BSA、NaN₃、牛血清蛋白、荧光红染料加入Tris-HCl缓冲液中溶解、过滤获得的。

优选地，浓缩清洗液中为0.84％NaCl，0.01％NaN₃，0.06％Tween20加入50mmol/L Tris-HCl缓冲液中制备而成。

与现有技术相比，本发明的有益效果在于：本发明中，检测乙肝病毒的试剂盒可以同时定量检测AFP、HBsAg两种抗原，且其重复性好、精密度高、特异性好，而且操作快速简便、价格相对较低、具有易实现自动化等优点。

【附图说明】

图1为本发明一种检测乙肝病毒的试剂盒的一个实施例的结构示意图。

【具体实施方式】

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不限定本发明。

此外，下面所描述的本发明各个实施方式中所涉及到的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。

实施例1:

本发明实施例1提供了一种检测乙肝病毒的试剂盒。图1为本发明一种检测乙肝病毒的试剂盒的一个实施例的结构示意图，如图1所示，检测乙肝病毒的试剂盒包括：包被的微孔反应板、铕标记的AFP(alpha fetoprotein，甲胎蛋白)标记抗体、钐标记的HBsAg(Hepatitis B Surface Antigen，乙型肝炎病毒表面抗原)标记抗体、分析缓冲液、荧光增强液、浓缩清洗液。