[发明专利]梨小食心虫初孵幼虫毒力测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及害虫防治领域，具体涉及梨小食心虫初孵幼虫毒力测定方法。背景技术

梨小食心虫是危害梨、桃、苹果等多种果树的一种重要害虫，发生世代多，不同类果园中和不同管理条件下的发生和危害规律差异较大。目前生产上最常用的防治技术仍是化学药剂防治。大量生产和室内实验表明，生产上常用的防治梨小食心虫药剂的杀卵效果均较差，无法达到有效防治梨小食心虫目的。而成虫羽化期持续时间较长，且飞行能力较强，因而药剂对其防治效果有限。目前生产上制定的化学农药的防治技术一般要求在成虫羽化盛期后5-7天进行化学农药的防治，针对的防治主体是梨小食心虫的初孵幼虫。但农药防治梨小食心虫幼虫和初孵幼虫的室内试验尚无报道，尤其是最基本的农药对梨小食心虫的毒力测定方法也未见报道。主要原因一是梨小食心虫的规模化饲养技术不成熟，不能提供足够数量的、发育期一致的个体；二是梨小食心虫为蛀果类害虫，在卵孵化后的数小时后即蛀入果实内，在田间无法采集到发育一致、且足够数量的卵或初孵幼虫来进行相关实验，采用其他发育时期进行试验，不能有效反应农药的真实效果；三是测定方法不易确定，目前鳞翅目食叶类害虫的室内毒力试验常用叶碟法、叶片浸泡法等方法，不适合梨小食心虫毒力的测定，也没有其他类似的害虫可供参考。因此,亟待开展针对梨小食心虫幼虫的毒力测定方法的研究,为提高化学防治效果作技术支撑。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本发明的目的是提供一种梨小食心虫初孵幼虫毒力测定方法，本发明方法简便易操作，试验中果实需求量有限，试验结果数据稳定，重复性强，可满足科研工作者、农药企业的研究技术需求。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：

一种梨小食心虫初孵幼虫毒力测定方法，包括以下步骤:

(1)配制供试农药各处理浓度；

(2)处理供试果实 采用直径3-4厘米的同一品种苹果的幼果, 每个处理的供试果实数量4-6个,洗净晾干后剪除果柄，将供试果实在供试农药溶液中浸泡5秒后拿出，用滤纸吸干多余的药液，将果实果柄朝下，平稳放置在干净的200-300毫升具盖的容器中, 每个容器放2-3个苹果；

(3) 接种梨小食心虫 将已变黑梨小食心虫卵,按每张卵纸上保留10-15粒卵，轻放在幼果上，盖上容器盖；

(4) 试验条件 将经(2)、(3)处理后的容器放置在25-26℃、相对湿度70%-80%的条件下观察；

（5）调查时间及指标 调查时间为接卵后54小时,调查指标包括:总虫数（根据卵孵化率确定害虫总虫数）、蛀果虫数（即为活虫数）（根据虫道数确定蛀果虫数）、死虫数、害虫死亡标准及对照处理的蛀果率；

(6) 计算出半致死浓度 根据处理与对照的总虫数、农药处理的蛀果数，计算出供试农药处理梨小食心虫死虫数和死亡率，计算回归方程、半致死浓度。

本发明梨小食心虫初孵幼虫毒力测定方法的依据

（1）供试果实的选择 苹果处于幼果时，在较高湿度下（饲养梨小食心虫需要长期保持相对湿度60%以上），能保持10-15天不腐烂，可满足梨小食心虫整个幼虫期的营养需求；梨小食心虫幼虫在幼果中蛀果率高且稳定，可稳定70%以上，且重复性好；同时使用幼果果实需求量较小，一种药剂6个浓度梯度的试验所需幼果量仅为2.0-2.5公斤，幼果可以结合苹果套袋过程中的疏果措施，进行大量收集和冷藏，试验成本低。如使用成熟苹果果实，梨小食心虫蛀果率低，一般要低于60%，且重复性差；成熟果实被害虫钻蛀后，在较高的相对湿度环境中容易腐烂，无法观察害虫的发育情况和数量；使用成熟果实所需的成本较高，一种药剂6个浓度梯度试验所需的成熟果实一般为3.0-3.5公斤，一种农药要获得最终的毒力测定结果需要大量的成熟果实。

（2）供试果实数量 试验每个处理的供试果实数量4-6个,每个果实上接种卵10-13粒，蛀果数为7-10个，可保证幼虫在果实表皮钻蛀后能分辨出蛀果的害虫数，也可确定有足够的统计分析幼虫样本数量。

（3）供试方法和虫态 采用浸果法，接种已变黑的卵6-8小时内即孵化为初孵幼虫，可使孵化后的初孵幼虫通过在浸过农药的果实上爬行、钻蛀或食用，来产生一定的毒害效果，与田间实际状态相同，同时试验操作简单，便于不同农药的毒力测定试验的开展；再者用变黑的卵接种，可保证幼虫的蛀果率达到70%以上。如使用初孵幼虫进行试验，虽可确保试虫确切数量，但由于虫体太小（长度不足0.1厘米）,操作过程虫子易因受伤而死亡，无法确定是否为农药作用的结果。再者，试验中需要大量试虫，如采用初孵幼虫需要小心操作，工作量大。