[发明专利]基于凝集素磁珠的结合珠蛋白异质体诊断肝癌试剂盒有效
| 申请号： | 201610311102.4 | 申请日： | 2016-05-11 |
| 公开（公告）号： | CN105785052B | 公开（公告）日： | 2017-10-10 |
| 发明（设计）人： | 张舒;郭坤;刘银坤 | 申请（专利权）人： | 复旦大学附属中山医院 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68;G01N33/574;G01N33/543 |
| 代理公司： | 上海容慧专利代理事务所(普通合伙)31287 | 代理人： | 于晓菁 |
| 地址： | 200032 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 基于 凝集素 结合 珠蛋白 质体 诊断 肝癌 试剂盒 | ||
1.一种基于凝集素磁珠的结合珠蛋白异质体诊断肝癌试剂盒，其特征在于包括：ELISA酶标板、磁珠-AAL、Hp-ELISA酶标板以及HCC预测模型：
P＝exp(-2.554+2.009×Fuc-Hp)/[1+exp(-2.554+2.009×Fuc-Hp)]；
其中，Fuc-Hp值的计算方法为：每个血清样品中Hp结合AAL的实际OD值与相同血清样品中Hp蛋白的实际OD值的比值，所述血清样品中Hp结合AAL的实际OD值通过磁珠-AAL-Hp-ELISA检测得到，血清样品中Hp蛋白的实际OD值通过常规Hp-ELISA检测得到，该模型区分肝癌病人和正常人的阈值为1.0154，大于1.0154为肝癌，小于1.0154为正常；
所述磁珠-AAL的制备方法包括步骤：
1)将磁珠置于EDC溶液中反应；
2)反应完成后，移除上清并用缓冲液清洗磁珠；
3)取一定量的AAL置于偶联液中，加入磁珠反应；
4)反应完成后，封闭未反应的活化基团。
2.如权利要求1所述的基于凝集素磁珠的结合珠蛋白异质体诊断肝癌试剂盒，其特征在于所述磁珠-AAL中磁珠与AAL的质量比为180-220:1。
3.如权利要求1所述的基于凝集素磁珠的结合珠蛋白异质体诊断肝癌试剂盒，其特征在于所述磁珠-AAL拆分为磁珠、AAL及磁珠-AAL的制备相关试剂。
4.如权利要求1所述的基于凝集素磁珠的结合珠蛋白异质体诊断肝癌试剂盒，其特征在于还包括封闭剂，所示封闭剂为含3％BSA的PBST溶液。
5.如权利要求1所述的基于凝集素磁珠的结合珠蛋白异质体诊断肝癌试剂盒，其特征在于还包括样品稀释液，所示样品稀释液为0.1M Tris-HCl、0.15M NaCl、1mM CaCl2、1mM MgCl2、pH 7.5的溶液。
6.如权利要求1所述的基于凝集素磁珠的结合珠蛋白异质体诊断肝癌试剂盒，其特征在于还包括含0.05％吐温20的pH 7.2-7.4的PBS溶液。
7.如权利要求1所述的基于凝集素磁珠的结合珠蛋白异质体诊断肝癌试剂盒，其特征在于还包括HPR标记的Hp抗体。
8.如权利要求1所述的基于凝集素磁珠的结合珠蛋白异质体诊断肝癌试剂盒，其特征在于还包括采集血样装置及操作说明书。
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