[发明专利]胶体金层析试纸条金标垫的处理方法有效
申请号: | 201610306907.X | 申请日: | 2016-05-11 |
公开(公告)号: | CN106018790B | 公开(公告)日: | 2018-04-17 |
发明(设计)人: | 李强;杨川;秦艺丹;王博雅;叶仕根;黎睿君 | 申请(专利权)人: | 大连海洋大学;李强 |
主分类号: | G01N33/558 | 分类号: | G01N33/558 |
代理公司: | 大连非凡专利事务所21220 | 代理人: | 闪红霞 |
地址: | 116000 辽宁*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 胶体 层析 试纸 条金标垫 处理 方法 | ||
技术领域
本发明涉及一种胶体金层析试纸条金标垫的处理方法,尤其是一种可加速胶体金标记抗体释放速度、无残留且可胶体金标记抗体活性的胶体金层析试纸条金标垫的处理方法。
发明内容
胶体金层析试纸条已被广泛应用于医药卫生、食品安全和环境检测等领域。胶体金免疫层析试纸条是宽度为0.3cm的试纸条,有底板,在底板上从一端依次由上至下呈阶梯状地粘有样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜及吸水垫,各部分之间重叠相接。通常在金标垫上喷涂有胶体金标记的抗体,硝酸纤维素膜上有包被抗体的检测线a和有羊抗鼠IgG构成的质控线b。其检测原理是利用吸水垫形成的毛细作用,置于样品垫上的被检测抗原首先与金标垫上的胶体金标记的抗体结合,并沿着硝酸纤维素膜(NC膜)继续向前移动,当到达固着有抗体的检测线a时,抗体将其捕获,随着反应进行,不断富集达到肉眼可见水平;过量的胶体金标记的抗体继续向前移动,到达固着有羊抗鼠IgG的质控线b时,被捕获并不断富集。因此若样品为阳性,则在检测线和质控线上均出现色条带,若样品为阴性,则仅在质控线上出现同样色彩的色条带。检测过程中,金标垫对胶体金标记抗体的释放十分关键,为了保证检测一致性,胶体金标记抗体必须在无损坏或聚集下干燥,且当样品上样时快速释放。目前对金标垫的处理方法是将胶体金标记的抗体直接喷涂在金标垫上,存在着胶体金标记抗体释放速度缓慢且有残留的现象。
发明内容
本发明是为了解决现有技术所存在的上述技术问题,提供一种可加速胶体金标记抗体释放速度、无残留且可胶体金标记抗体的胶体金层析试纸条金标垫的处理方法。
本发明的技术解决方案是:一种胶体金层析试纸条金标垫的处理方法,是将金标垫置于处理液中浸泡10~20min,取出后35~40℃下烘干,所述处理液组分及质量百分比如下:BSA 1%~ 5%,海藻糖5%~10%,蔗糖2%~3%,Tween-20 1%-2%,Triton X-405 1%-2%,余量为纯水。
所述处理液组分及最佳质量百分比如下:BSA 3%,海藻糖8%,蔗糖2%,Tween-20 2%,Triton X-405 2%,余量为纯水。
本发明是在喷涂胶体金标记的抗体之前对金标垫的处理方法,经处理的金标垫不但可保护胶体金标记抗体活性,避免抗体损坏或聚集,同时在样品上样时,可加速胶体金标记抗体释放速度且保证无残留,提高了检测速度及可靠性。
附图说明
图1是本发明实施例的检测效果图。
具体实施方式
实施例1:
a. 按下列组分及质量百分比配置成处理液:BSA 5%,海藻糖10%,蔗糖2%,Tween-20 2%,Triton X-405 2%,余量为纯水;
b. 将金标垫置于处理液中浸泡10min,取出后35℃下烘干。
再按照现有技术的方法将胶体金标记的抗体喷涂在烘干后的金标垫上即可。
实施例2:
a. 按下列组分及质量百分比配置成处理液:BSA 1%,海藻糖5%,蔗糖3%,Tween-20 1%,Triton X-405 1%,余量为纯水;
b. 将金标垫置于处理液中浸泡20min,取出后40℃下烘干。
再按照现有技术的方法将胶体金标记的抗体喷涂在烘干后的金标垫上即可。
实施例3:
a. 按下列组分及质量百分比配置成处理液:BSA 3%,海藻糖8%,蔗糖2%,Tween-20 2%,Triton X-405 2%,余量为纯水;
b. 将金标垫置于处理液中浸泡15min,取出后37℃下烘干。
再按照现有技术的方法将胶体金标记的抗体喷涂在烘干后的金标垫上即可。
试验:
试验例:用本发明实施例3同样制备爱德华菌胶体金试纸条A。
对比例:按照现有技术,直接在金标垫上喷涂胶体金标记的抗体,制备爱德华菌胶体金试纸条B。
将100μL阳性样品分别滴加在爱德华菌胶体金试纸条A和爱德华菌胶体金试纸条B上。
观察5min,结果如图1所示:
爱德华菌胶体金试纸条A在5min时胶体金标记的抗体释放完毕且无残留。
爱德华菌胶体金试纸条B在5min时胶体金标记的抗体金标抗体并未释放完毕,试验结束后胶体金标记的抗体仍有残留。
本发明处理剂中的BSA起到封闭金标垫的作用,避免胶体金标记的抗体与金标垫非特异性结合导致残留;海藻糖和蔗糖起到保护金标抗体活性的作用;Tween-20和Triton X-405起到加速金标抗体释放的作用。本发明各种组分相互配合,可使胶体金标记抗体快速彻底释放,对胶体金标记抗体具有一定的保护作用。
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