[发明专利]双波长高效液相色谱检测血栓通的方法

说明书

技术领域

本发明提供一种测定血栓通的方法，具体地说，是一种双波长 高效液相色谱检测血栓通的方法；属于化学检测技术领域。

背景技术

注射用血栓通(冻干)是用三七总皂苷，加注射用水，灌装，冷 冻干燥，制成的制剂，收载于国家药品监督管理局标准(试行) WS-10460(ZD-0460)-2002。因为世界卫生组织(WHO)、美国食品与 药物管理局(FDA)以及中国食品药品监督管理局(SFDA)等机构已经 把HPLC指纹图谱作为一种可靠的质量控制方法。

发明内容

针对上述不足，本发明的目的是提供一种采用双波长检测，梯 度洗脱，色谱峰分离度好的检测血栓通的方法。

为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案如下：

一种双波长高效液相色谱检测血栓通的方法，依次包括下述步 骤：

1)精密称取注射用血栓通0.5g，置l0mL量瓶中，并加水稀释 至刻度，0.22μm微孔滤膜滤过，即得供试品溶液；

2)取供试品溶液2μl注入液相色谱仪，流动相流速为 0.8mL/min，采用梯度洗脱，检测波长为：267nm，287nm；检测 器：PAD、柱温为35℃；

所述流动相由A相和B相组成，A相为甲醇-水；B相为乙腈- 水-0.5％磷酸水溶液；所述的A相中甲醇与水体积比10:90，B相中 乙腈、水、0.5％磷酸水溶液的体积比为5：92：3；

所述的梯度洗脱参数如下：

0-3min；A相与B相的体积比为10:90；

3-5min；A相与B相的体积比为15:85；

5-5.5min；A相与B相的体积比为30:70；

5.5-6.1min；A相与B相的体积比为50:50；

6.1-9min；A相与B相的体积比为20:80；

9-9.1min；A相与B相的体积比为20:80；

进一步的，上述的双波长高效液相色谱检测血栓通的方法，所 述的血栓通为冻干粉。

进一步的，上述的双波长高效液相色谱检测血栓通的方法，所 述的高效液相色谱仪为ThermoU3000高效液相色谱仪。

与现有技术相比，本发明提供的技术方案采用双波长检测，梯 度洗脱，使得色谱峰分离度好，本方法可操作性强，准确性、重现 性均好，可用于注射用血栓通(冻干)的质量控制。

具体实施方式

下面结合具体实施方式，对本发明的权利要求做进一步的详细 说明，但不构成对本发明的任何限制，任何在本发明权利要求保护 范围所做的有限次的修改，仍在本发明的权利要求保护范围之内。

本发明所涉及的到百分含量浓度，除特殊说明外，溶质为液体 的均为体积浓度，溶质为固体的均为质量浓度。

实施例1

一种双波长高效液相色谱检测血栓通的方法，所述的血栓通为 冻干粉，依次包括下述步骤：

1)精密称取注射用血栓通0.5g，置l0mL量瓶中，并加水稀释 至刻度，0.22μm微孔滤膜滤过，即得供试品溶液；

2)取供试品溶液2μl注入液相色谱仪，ThermoU3000高效液 相色谱仪，流动相流速为0.8mL/min，采用梯度洗脱，检测波长 为：267nm，287nm；检测器：PAD、柱温为35℃；

所述流动相由A相和B相组成，A相为甲醇-水；B相为乙腈- 水-0.5％磷酸水溶液；所述的A相中甲醇与水体积比10:90，B相中 乙腈、水、0.5％磷酸水溶液的体积比为5：92：3；

所述的梯度洗脱参数如下：

0-3min；A相与B相的体积比为10:90；

3-5min；A相与B相的体积比为15:85；

5-5.5min；A相与B相的体积比为30:70；

5.5-6.1min；A相与B相的体积比为50:50；

6.1-9min；A相与B相的体积比为20:80；

9-9.1min；A相与B相的体积比为20:80；