[发明专利]百年草中黄酮类物质提取工艺的筛选

说明书

技术领域

本发明涉及仙人掌系植物百年草中黄酮类物质提取工艺筛选的研究。

百年草是生长于韩国济州岛的一种仙人掌的果实,果实本身为粉红色,因此茶的颜色也颇为鲜艳,且无色素,用这种仙人掌的果实制成的茶,能治疗消化不良。 百年草实的萃取物具有加速伤口愈合、使肌肤柔软细腻、防止皮肤干燥、减少皱纹等神奇的功效，因为百年草实富含抗氧化剂、核黄素和硫胺（维生素B1），是滋润保养肌肤极佳的营养成分。此外，百年草实也能促进人体正常纤维细胞的扩散再生，不论对身体内部还是表皮创伤的愈合都十分有帮助。颜色鲜艳的百年草实要经过四年的成长才能成熟，但是这种等待是值得的。临床实验指出，百年草实可以增加皮肤的柔软度，减少岁月在皮肤上留下的痕迹。使用胸腺嘧啶脱氧核甘整合实验法，科学家发现将百年草实萃取物配合使用时，正常人体纤维细胞的增殖会提高。这些结果对身体内和在皮肤外表伤口愈合的研究都意义重大，但目前尚未有关于百年草中黄酮提取的系统方法。

本发明的目的是提供提取百年草中黄酮类物质的方法。

发明内容

本发明的技术方案如下：

一种百年草中黄酮类化合物的提取方法，它包括以下步骤：

A．将百年草研磨成果浆；

B．在70℃用40%乙醇提取40分钟，液料比为20；

C．单因素考察，得到各因素对百年草果中黄酮类物质提取率的影像效果，采用正交分解实验得出各因素对黄酮提取率影响的主次顺序为：提取浓度>提取时间>液料比>提取温度；

D．得到百年草中黄酮类物质的最佳提取条件为：提取浓度>提取时间>液料比>提取温度；

具体实施方式：

1.将百年草研磨成果泥，准确称取1.0g 百年草于锥形瓶中，加入体积分数50%的乙醇溶液30mL，在60℃的水浴中加热20min，冷却过滤至50mL 容量瓶中，用50% 的乙醇定容。移液管从容量瓶中吸取3mL 溶液，在420nm 的波长下测定吸光度。

2.提取百年草果黄酮类物质单因素实验研究

A.提取时间的选择:分别称取1.0g百年草果于5个锥形瓶中，各加入20mL体积分数为40%的乙醇溶液，置于70℃水浴锅中分别加热10、20、30、40、50min，冷却过滤至50mL容量瓶中，并用40%的乙醇定容，在420nm 的波长下测定吸光度。

B.料液比的选择:分别称取1.0g 百年草果于5个锥形瓶中，分别加入10、20、30、40、50mL 50%的乙醇溶液，在70℃水浴锅中加热20min，冷却后过滤至50mL 容量瓶中，并用50% 的乙醇定容，在420nm的波长下测定吸光度。

C.提取液浓度的选择:分别称取1.0g 百年草果于5个锥形瓶中，依次加入20mL浓度分别为40%、50%、60%、70%、80%的乙醇溶液，在70℃水浴锅中加热20min，冷却过滤至50mL容量瓶中，分别用相应浓度的乙醇定容，在420nm的波长下测定吸光度。

D.提取温度的选择:分别称取1.0g 百年草果于5 个锥形瓶中，各加入20mL 50% 的乙醇溶液，依次在40、50、60、70、80℃的水浴锅中加热20min，冷却过滤至50mL 容量瓶中，用50% 的乙醇溶液定容，在420nm的波长下测定吸光度。

3.提取百年草果黄酮类物质的多因素正交实

验根据以上实验结果，以提取温度、提取液浓度、料液比、提取时间为因素设计正交实验，以提取量为评价指标，以确定最佳提取条件，正交实验因素水平如表1。

4.芦丁标准曲线的绘制准确称取芦丁标准品0.0137g，用体积分数40%的乙醇溶解，定容至50mL，得到浓度为0.274mg /mL的芦丁标准溶液。精确吸取芦丁标准溶液0、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mL于6个25mL容量瓶中，各加入20mL质量分数1%的AlCl3溶液，用体积分数50%的乙醇定容至刻度，静置10min后于420nm 处测吸光度，绘制标准曲线。