[发明专利]一种高性能的人血液免疫球蛋白M检测试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及的是生物技术领域，具体涉及的是一种高性能的人血液免疫球蛋白M 检测试剂盒。

背景技术

IgM占血清免疫球蛋白总量的5％-10％，血清浓度约1mg/ml。单体IgM以膜结合型 (mIgM)表达于细胞表面，构成B细胞抗原受体(BCR)。分泌型IgM为五聚体，是分子量最大的 Ig，沉降系数为19S，称为巨球蛋白，一般不能通过血管壁，主要存在于血液中。五聚体IgM含 10个Fab段，有很强的抗原结合能力；含5个Fc段，比IgG更易激活补体。天然的血型抗体为 IgM，血型不符的输血可致严重溶血反应。IgM是个体发育过程中最早合成和分泌的抗体，在 胚胎发育晚期的胎儿即能产生IgM，故脐带血IgM升高提示胎儿有宫内感染(如风疹病毒或 巨细胞病毒等感染)。IgM也是初次体液免疫应答中最早出现的抗体，是机体抗感染的“先头 部队”；血清中检出IgM提示新近发生感染，可用于感染的早期诊断。膜表面IgM是B细胞抗原 受体的主要成分。只表达mIgM是未成熟B细胞的标志。

在感染过程中IgM首先出现，但持续时间不长，是近期感染的标志。IgM的正常参考 值为0.40～2.60g/L。

临床意义

增高：巨球蛋白血症、病毒性肝炎急性期、结缔组织疾病、恶性肿瘤、传染性单核细 胞增多症、伤寒、梅毒、黑热病、疟疾、丝虫病、支原体肺炎、风疹等。

减低：免疫缺陷病、IgA、IgG型的多发性骨髓瘤、何杰金病、慢性淋巴细胞性白血 病、先天愚型、蛋白丢失性胃病、网状内皮细胞增生性疾病、尿毒症。

目前市面上检测血液免疫球蛋白M的试剂盒普通存在着线性范围较低，抗原过剩 不够的现象。

发明内容

为了改善上述存在问题，本发明提供了一种高性能的人血液免疫球蛋白M检测试 剂盒。

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

一种高性能的人血液免疫球蛋白M检测试剂盒，包括试剂2，所述试剂2为标记有兔 抗人免疫球蛋白M多克隆抗体的胶乳颗粒溶液。其中，试剂1选用常规的磷酸盐缓冲液、 Good’s缓冲液或甘氨酸缓冲液即可。

值得说明的是，本发明是针对试剂盒中的试剂2进行改进，然而试剂1选用市面上 的常用试剂均可。

由于过低的抗体使用量，在满足样本抗体比例不变的情况下，需要样本稀释比例 提高，导致过低的样本量，试剂灵敏度无法满足临床使用。抗体量过大，在标记过程中容易 导致胶乳凝聚，试剂批间差异难以控制，并且试剂成本过高，无法接受。胶乳粒径过小，试剂 灵敏度无法保证，胶乳粒径过大，胶乳微球颗粒悬浮受到影响，容易沉降，故而，本发明的胶 乳颗粒粒径范围为80nm～200nm，每升试剂2中抗体的用量为14ml～26ml。

具体地，本发明是采用化学偶联方法将兔抗人免疫球蛋白M多克隆抗体标记在胶 乳颗粒上。

作为一种优选，所述试剂盒对样本进行检测时，样本与抗体的体积比为1:6.3～1： 11.7。通过上述限定，能够避免样本与抗体比例过高或过低，因为样本与抗体比例过高，将 导致反应体系中抗原过多，降低试剂的抗原过剩范围甚至线性范围；过低时，将导致反应体 系中抗原量太少，试剂灵敏度无法满足临床使用。

所述试剂盒是基于胶乳免疫比浊法检测人血液免疫球蛋白M，其线性范围为 0.10g/L～12.00g/L，抗原过剩范围达到180g/L。

具体地，所述兔抗人免疫球蛋白M多克隆抗体为Dako公司生产的兔抗人免疫球蛋 白M多克隆抗体，或为GeneTex公司生产的兔抗人免疫球蛋白M多克隆抗体。

另外，所述试剂盒适用于具有自动样本稀释功能的全自动分析仪器，如迪瑞、迈 瑞、Roche、Hitachi、Olympus等多种全自动生化分析仪。

本发明具有以下优点及有益效果：

1、使用本发明的试剂盒对人尿液中的血液免疫球蛋白M进行测定，因线性范围较 进口试剂提高2倍，使用时大幅度减少了需要人工稀释复测的样本数量，大幅度节约了人力 和试剂，极大地提高了检测效率，并节约了成本。

2、本发明的试剂盒抗原过剩范围广，有效避免了临床结果被低估甚至假阴性结果 的出现，测定结果可靠性相比进口试剂更高。