[发明专利]PD-L1和PD-L2重组蛋白及其用途

说明书

本发明提出了一种重组蛋白及其用途，该重组蛋白包括：免疫检查点分子片段；辅助T细胞抗原决定基片段；以及免疫刺激分子片段。该重组蛋白在体内刺激产生抗免疫检查点抗体，调动体内已经存在的自发诱导产生的免疫细胞CTL，并且刺激产生抗免疫检查点的CTL，进而特异性杀伤肿瘤细胞。本发明实施例所提出的重组蛋白引起的对肿瘤细胞的主动免疫杀伤效果显著。

技术领域

本发明涉及生物工程领域，具体地，本发明涉及重组蛋白及其用途。

背景技术

癌症，由于细胞内基因突变导致细胞增殖失控的一种疾病。目前已成为人类健康的重大威胁，是导致人类死亡的主要原因之一。世界卫生组织(WHO)在发表的《全球癌症报告2014》中指出，2012年全球癌症患者和死亡病例都在迅速增加，而新增癌症病例有近一半出现在亚洲，其中大部分在中国，中国新增癌症病例高居第一位。《2012年中国肿瘤登记年报》数据显示，中国每年新增癌症病例约350万，约有250万人因此死亡。因此，寻找高效特异的癌症治疗方法具有重大的临床价值。

传统的肿瘤治疗方法主要包括手术、放疗和化疗，但这几种方法都具有较大的局限性，比如由于癌细胞的近端入侵或远端转移，手术切除后的肿瘤转移复发率较高，而放疗和化疗对于机体自身的正常细胞尤其是造血系统和免疫系统会造成严重的损害，因此对于已发生肿瘤转移的患者也很难达到较好的远期疗效。随着肿瘤分子机制的深入研究和生物技术的进一步发展，靶向药物治疗和免疫治疗在肿瘤的综合治疗中发挥着愈来愈大的作用。靶向疗法主要包括单克隆抗体(有时归为被动胞回输和肿瘤疫苗等。免疫疗法通过调动机体的免疫系统，增强肿瘤微环境抗肿瘤免免疫疗法)和小分子靶向药物，而免疫疗法主要包括细胞因子疗法、免疫检验点单抗、过继免疫疗法，从而控制和杀伤肿瘤细胞，因此有效率高，特异性强，耐受性好的优点，在肿瘤治疗中具有广阔的前景。

肿瘤免疫治疗疫苗主要包括肿瘤细胞疫苗、树突状细胞(DC细胞)疫苗、蛋白多肽疫苗、核酸疫苗、基因工程疫苗和抗独特型肿瘤疫苗.这些疫苗能够杀伤肿瘤的主要机制即是通过引起患者针对于肿瘤特异性抗原免疫反应，包括抗体反应和细胞毒性T淋巴细胞(CTL)特异性杀伤等。

然而，这些肿瘤疫苗针对肿瘤相关抗原，临床疗效弱，仍有待进一步深入研究和开发.来增强临床疗效。

发明内容

本发明是发明人基于以下问题和事实的发现而提出的：

肿瘤细胞高表达免疫检查点分子PD-L1或PD-L2，与活化的细胞毒性T淋巴细胞上表达的PD-1相结合，进而抑制肿瘤的T淋巴细胞反应，来逃避细胞毒性T淋巴细胞的免疫杀伤。目前，通过体外生产抗PD－L1/PD抗体，再注射病人体内的被动免疫疗法，虽可短暂激活病人体内已经存在自发诱导产生的免疫细胞-细胞毒性T淋巴细胞(CTL)，来杀伤肿瘤细胞，但临床效果持续时间短，需不断重复注射抗PD－L1/PD抗体，来维持体内抗体浓度。

本发明旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本发明的一个目的在于提出了一种具有引起肿瘤特异性抗原免疫反应的重组PD-L1蛋白，该蛋白通过主动免疫，在病人体内持续刺激产生抗PD－L1抗体，调动病人体内已经存在的自发诱导产生的免疫细胞CTL，并且刺激产生新的抗PD-L1CTL，进而特异性杀伤肿瘤细胞。本发明所提出的重组蛋白引起的对肿瘤细胞的主动免疫杀伤效果显著。

在本发明的第一方面，本发明提出了一种重组蛋白。根据本发明的实施例，所述重组蛋白包括：免疫检查点分子片段；辅助T细胞抗原决定基片段；以及免疫刺激分子片段。本发明实施例所提出的重组蛋白可在体内持续刺激产生抗免疫检查点抗体，调动体内已经存在的自发诱导产生的免疫细胞CTL，并且刺激产生抗免疫检查点的CTL，进而特异性杀伤肿瘤细胞。本发明实施例所提出的重组蛋白引起的对肿瘤细胞的主动免疫杀伤效果显著。

根据本发明的实施例，所述重组蛋白还可以及进一步包括如下附加技术特征至少之一：