[发明专利]一种阶层有序大孔‑介孔硅胶整体柱牛血清白蛋白印迹聚合物及其制备方法

权利要求书

1.一种阶层有序大孔-介孔硅胶整体柱牛血清白蛋白印迹聚合物，其特征在于，该阶层有序大孔-介孔硅胶整体柱牛血清白蛋白印迹聚合物由氧化硅骨架和大孔构成，在氧化硅骨架上有均匀分布的介孔；所述大孔孔径为1~1.2μm，大孔之间形成互相连通的结构，所述介孔孔径为6~7nm；所述阶层有序大孔-介孔硅胶整体柱牛血清白蛋白印迹聚合物对牛血清白蛋白的吸附容量可达121.6mg/g。

2.一种阶层有序大孔-介孔硅胶整体柱牛血清白蛋白印迹聚合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1、聚苯乙烯胶体晶体的合成：聚苯乙烯溶于一定量的水中，聚苯乙烯与水的用量比为0.4~1g：8mL；将溶液超声20min，然后自然沉降一周，小心移除上层液体，25℃真空干燥48h，得到聚苯乙烯胶体晶体；

步骤2、阶层有序大孔-介孔硅胶整体柱的合成：一定量的正硅酸四乙酯，水，盐酸，聚(1，2-亚乙基二醇)嵌段聚(丙二醇)嵌段聚(1，2-亚乙基二醇)和无水乙醇配制成为前驱体溶液，将聚苯乙烯胶体晶体加入到溶液中，浸渍1h，得到混合液A，其中盐酸浓度为2mol/L；然后将混合液A在30℃浸渍蒸发48h；将合成的块状材料置于管式炉中，在空气中以1℃•min^-1的升温速度缓慢升温，至550℃时恒温6h，得到阶层有序大孔-介孔硅胶整体柱，简称为HOM；

步骤3、阶层有序大孔-介孔硅胶整体柱用γ-(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷修饰材料制备：0.4g步骤2中所得的HOM溶于40mL无水乙醇中，然后取2mL γ-(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷(MPS)加入到混合溶液中，40℃反应12h；反应后将产物用无水乙醇洗涤3次，以洗脱未反应的MPS，50℃真空干燥得到MPS修饰的HOM，简称为HOM@MPS；

步骤4、阶层有序大孔-介孔硅胶整体柱牛血清白蛋白印迹聚合物(BSA-MIP)的制备：步骤3得到的HOM@MPS分散于磷酸盐缓冲液中，超声10min，得到混合液B，将丙烯酰胺，N,N’-亚甲基双丙烯酰胺，牛血清白蛋白加入到混合液B中，得到混合液C，对混合液C在35℃搅拌1h，通N₂，将过硫酸铵和N,N,N,N-四甲基乙二胺加入到溶液中，35℃反应24h；反应后，用去离子水反复洗涤5次以去除未反应的AM、APS和BSA，在25℃真空干燥；然后用500~1000mL含100mg/L的十二烷基硫酸钠的乙酸：水溶液洗去BSA模板分子，并用去离子水洗至中性，25℃真空干燥即得阶层有序大孔-介孔硅胶整体柱牛血清白蛋白印迹聚合物。

3.根据权利要求2所述的一种阶层有序大孔-介孔硅胶整体柱牛血清白蛋白印迹聚合物的制备方法，其特征在于，步骤2中，制备混合液A时，所用的正硅酸四乙酯，水，盐酸，聚(1，2-亚乙基二醇)嵌段聚(丙二醇)嵌段聚(1，2-亚乙基二醇)，无水乙醇和聚苯乙烯胶体晶体的质量比为1.5~2.5g：0.9g：0.1~0.8g：1.0g：15g：0.4~1g。

4.根据权利要求2所述的一种阶层有序大孔-介孔硅胶整体柱牛血清白蛋白印迹聚合物的制备方法，其特征在于，步骤4中，制备混合液B时，HOM@MPS的浓度为2.5~5mg/mL；制备混合液C时，所用的HOM@MPS，丙烯酰胺，N,N’-亚甲基双丙烯酰胺，牛血清白蛋白，过硫酸铵，N,N,N,N-四甲基乙二胺的用量比为0.05~0.10g：35.5~71.0mg：77mg：10~20mg：8~10mg：10μL。

5.根据权利要求2所述的一种阶层有序大孔-介孔硅胶整体柱牛血清白蛋白印迹聚合物的制备方法，其特征在于，步骤4中，所述的含100mg/L的十二烷基硫酸钠的乙酸：水溶液中，乙酸与水的体积比为1：9。

6.根据权利要求2所述的一种阶层有序大孔-介孔硅胶整体柱牛血清白蛋白印迹聚合物的制备方法，其特征在于，步骤4中所述的磷酸盐缓冲液浓度为20mmol/L，pH为7.0~8.0。