[发明专利]一种桦纤孔菌总三萜提取方法在审
| 申请号: | 201610179537.8 | 申请日: | 2016-03-25 |
| 公开(公告)号: | CN105663178A | 公开(公告)日: | 2016-06-15 |
| 发明(设计)人: | 郭晓帆;于妍;王守明;王亮;王威;刘冰雁;王玉峰;翟玉莹;张婷;韩琳 | 申请(专利权)人: | 沈阳工学院 |
| 主分类号: | A61K36/07 | 分类号: | A61K36/07 |
| 代理公司: | 辽宁沈阳国兴知识产权代理有限公司 21100 | 代理人: | 姜婷婷 |
| 地址: | 113122 辽宁*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 桦纤孔菌总三萜 提取 方法 | ||
技术领域
本发明涉及一种富集矿质元素的食用菌提取方法,具体涉及一种桦纤孔菌总三萜 提取方法。
背景技术
桦纤孔菌(Inonotusobliquus(Ach.exPers.)Pilát)也称桦褐孔菌、白桦茸,属 于担子菌亚门、层菌纲、非褶菌目、锈革孔菌科,在外文资料中,其常以学名Inonotus obliquus出现。桦纤孔菌菌核呈瘤状,无柄,表面黑灰色,内部黄褐,老后表面深裂,坚硬,干 时较脆。具有增强免疫,预防糖病尿等疗效。作为桦纤孔菌的一种主要活性成分,三萜可用 于糖尿病、恶性肿瘤、心血管疾病、肝病以及艾滋病的预防和治疗。在三萜类化合物中,白桦 脂醇及其衍生物有防治白血病,抗艾滋病病毒活性和抗黑色素细胞瘤活性等特殊功效。因 此,桦纤孔菌具有重大的药学价值。矿质元素是人和动物机体的重要组成部分,具有重要的 生理功能。食用菌中富集的矿质元素大部分以有机态存在,且稳定性好,其中大部分有机态 的矿质元素均与蛋白质、多糖等生物大分子结合,且促进了矿质元素的吸收与利用。目前对 桦纤孔菌三萜化合物提取工艺及富集矿质元素后营养含量测定尚少报道,传统的三萜类成 分提取方法:萃取法,半仿生提取法,化学衍生法,超声循环技术等易导致三萜降解,近年来 超临界流体萃取法成为一种新的提取分离技术,具有保持有效成分活性和无溶剂残留等优 点。但是设备复杂,运行成本高,提取范围狭窄,因而没有被广泛应用。
发明内容
本发明针对上述技术中存在的不足,提供一种桦纤孔菌总三萜提取方法,解决了 现有技术中提取时能耗大,生产成本高,提取率低的问题。
本发明采用的技术方案如下:
一种桦纤孔菌总三萜的提取方法,其具体操作步骤如下:
步骤1、预处理:桦纤孔菌菌丝在60-80℃条件下,干燥10-16小时;
步骤2、破壁:将上述预处理后的桦纤孔菌菌丝破壁粉碎,过200目筛,加入95%乙 醇,95%乙醇与菌丝的质量比为30-50:1,配制成混悬液,浸泡24h;
步骤3、超声波处理:将上述桦纤孔菌混悬液超声波处理,60-80℃,功率400W,时间 10-20min;
步骤4、减压浓缩:将上述超声波处理后的混悬液减压浓缩至AmL,即得AmL浓缩液; 于13000-16000r/min,0-5℃条件下离心8-15min,取上清液,向上清液中加入95%乙醇定容 至AmL;
步骤5、总三萜吸附与纯化:将上述定容后的液体以2BV/h的流速过大孔吸附树脂 柱层析,以80%乙醇洗脱,变色后收集洗脱出的溶液,洗脱出的溶液即为提取物质。
本发明的优点在于:本发明采取破壁粉碎与超声波辅助提取交替进行的一种破壁 方法,促使细胞完全破裂的同时避免了高温对原料说造成的营养损失、有效成分破坏严重 的不良影响。超声波辅助提取桦纤孔菌总三萜,机械作用也加速细胞壁的破碎,促进胞内总 三萜活性物质的快速溶出。与传统多糖提取相比,破壁粉碎和和超声波辅助提取有效结合, 具有能耗低、总三萜提取率高,生产成本低的特点。通过本发明破壁联合超声波提取方法, 桦纤孔菌总三萜提取率是传统提取方法的1.15~1.72倍。
附图说明
图1为本发明提取桦纤孔菌总三萜的工艺流程图。
具体实施方式
实施例1
步骤1、预处理:桦纤孔菌菌丝在70℃条件下,干燥12小时;
步骤2、破壁:将上述预处理后的桦纤孔菌菌丝破壁粉碎,过200目筛,称取100g桦 纤孔菌粉溶于100mL95%乙醇中配制成浓度为2%混悬液,浸泡24h;
步骤3、超声波处理:将上述桦纤孔菌混悬液超声波处理,70℃,功率400W,时间 15min;
步骤4、减压浓缩:将上述超声波处理后的混悬液,常压80℃条件下,减压浓缩至 20mL,即得浓缩液;于14000r/min,0℃条件下离心10min,取上清液,向上清液中加入95%乙 醇定容至20mL;
步骤5、总三萜吸附与纯化:对直径为1.5cm,柱长为50cm的大孔吸附树脂柱进行预 处理,用95%乙醇浸泡24h,再用95%乙醇洗至流出液与水的体积比为1:5时不浑浊,之后用 水洗至无醇味,最后水洗至中性,将上述步骤4定容后的液体以2BV/h的流速过上述预处理 后的大孔吸附树脂柱层析,以80%乙醇洗脱,变色后收集洗脱出的溶液,洗脱出的溶液即为 提取物质。
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