[发明专利]一种基因芯片探针剥离液

说明书

本发明公开了一种基因芯片探针剥离液，包括以下质量分数的A溶液、B溶液和C溶液三种组分：A溶液：10％脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠、6％十二烷基硫酸钠、6％丙三醇、3％十二烷基二甲基氧化胺、3％烷基醇酰胺、2％氯化钠、1％羟甲基纤维素钠；B溶液：1mg/ml DNA酶Ⅰ；C溶液：50％二氯异氰尿酸钠。本发明组成简单、成本低廉、安全环保，清除芯片表面探针及杂质干净而且不影响芯片表面的化学修饰，不影响再次杂交的结果，从而使芯片可以反复利用，大大降低芯片的使用费用。

技术领域

本发明属于基因芯片相关技术领域，具体的公开了一种基因芯片探针剥离液。

背景技术

基因芯片(又称DNA芯片、生物芯片)技术系指将大量(通常每平方厘米点阵密度高于400)探针分子固定于支持物上后与标记的样品分子进行杂交，通过检测每个探针分子的杂交信号强度进而获取样品分子的数量和序列信息。通俗地说，就是通过微加工技术，将数以万计、乃至百万计的特定序列的DNA片段(基因探针)，有规律地排列固定于2cm2的硅片、玻片等支持物上，构成的一个二维DNA探针阵列，与计算机的电子芯片十分相似，所以被称为基因芯片。

基因芯片技术由于同时将大量探针固定于支持物上，所以可以一次性对样品大量序列进行检测和分析，从而解决了传统核酸印迹杂交(Southern Blotting和NorthernBlotting等)技术操作繁杂、自动化程度低、操作序列数量少、检测效率低等不足。而且，通过设计不同的探针阵列、使用特定的分析方法可使该技术具有多种不同的应用价值，如基因表达谱测定、实变检测、多态性分析、基因组文库作图及杂交测序等。

基因芯片的最大优点在于其高通量，然而，芯片价格高昂，且需要重复实验来获得有意义的统计显著性，这些限制了它们的应用。所以在实际使用中常需要进行探针剥脱步骤以实现芯片的重复使用。现有公开报道的重复利用方法包括基于RNase H的剥离技术、微生物基因芯片的再生利用、用于传感器芯片的再生利用等。基于RNase H的剥离技术的剥离液主要适用于探针类型为RNA探针的芯片，对DNA寡核苷酸探针不适用。微生物基因芯片的再生利用的剥离液主要成分为柠檬酸钠、十二烷基磺酸钠，成分虽简单，但实际操作中需将芯片放入水浴锅中100℃煮沸，不太适用于聚苯乙烯芯片。用于传感器芯片的再生利用的剥离液分为CM5芯片、SA芯片等。CM5芯片的再生主要由环氧氯丙烷、二甘醇二甲醚溶液、NaOH、乙醇、葡聚糖溶液、溴乙酸等成分构成，成分众多、复杂，操作则更加繁琐。SA芯片的再生主要由N-羟基丁二酰亚胺、EDC、链霉亲和素溶液、盐酸乙醇胺溶液构成，不但对聚苯乙烯芯片无效，而且操作更麻烦。

为了解决这些问题，我们研发了一种新型基因芯片探针剥离液，当制备了探针、完成了杂交的的芯片，通过使用该剥离液并通过一定的操作后，再次使用的效果与原来的芯片相同，且背景无显著增加，即芯片可以重复利用，从而可以大大降低每个芯片的费用。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种基因芯片探针剥离液，可以通过一定的操作方法，实现基因芯片的重复利用。

本发明所采用的技术方案为：

一种基因芯片探针剥离液，包括以下质量分数的A溶液、B溶液和C溶液三种组分：其中A溶液含有10～20％阴离子表面活性剂、6％丙三醇、2～5％两性表面活性剂、2～5％非离子表面活性剂、0～4％Nacl、0～2％乳化稳定剂；B溶液含有0.5～2mg/ml DNA水解酶；C溶液含有50％的氧化性杀菌剂。

进一步地，所述阴离子表面活性剂选自脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠、十二烷基硫酸钠、α-磺基脂肪酸甲酯、油酰氧基乙磺酸钠中的一种或几种。

进一步地，所述两性表面活性剂选自十二烷基二甲基氧化胺、十二烷基乙氧基磺基甜菜碱、十二烷基羟丙基磺基甜菜碱、十二烷基磺丙基甜菜碱中的一种或几种。

进一步地，所述非离子表面活性剂选自烷基醇酰胺、烷基酚聚氧乙烯醚、碳脂肪醇聚氧乙烯醚、失水山梨醇酯中的一种或几种。