[发明专利]检测和/或鉴定腺伴随病毒(AAV)序列以及分离所鉴定的新型序列的方法

权利要求书

1.一种重组腺伴随病毒(即重组AAV)，包含至少一种AAVrh.8衣壳，所述衣壳由vp1蛋白、vp2蛋白和vp3蛋白构成，其中，所述vp1衣壳蛋白由SEQ ID NO:97中第1至736位氨基酸构成，所述重组AAV还包含小基因，所述小基因具有3’和5’AAV反向末端重复序列和与调节序列操作性相连的转基因编码序列，所述调节序列指导所述转基因编码序列在宿主细胞中的表达。

2.如权利要求1所述的重组腺伴随病毒，其中，所述vp2蛋白由SEQ ID NO:97中第138至736氨基酸构成。

3.如权利要求1所述的重组腺伴随病毒，其中，所述vp3蛋白由SEQ ID NO:97中第203至736氨基酸构成。

4.如权利要求1-3中任一项所述的重组腺伴随病毒，其中，所述反向末端重复序列来自AAV2。

5.一种组合物，包含权利要求1至4中任一项所述重组腺伴随病毒和生理相容性介质。

6.一种分离的AAV衣壳蛋白，所述AAV衣壳蛋白选自：由SEQ ID NO:97中第1至736位氨基酸构成的vp1衣壳蛋白；由SEQ ID NO:97中第138至736位氨基酸构成的vp2衣壳蛋白；和由SEQ ID NO:97中第203至736位氨基酸构成的vp3衣壳蛋白。

7.一种分离或合成的核酸分子，其中包含编码权利要求6所述蛋白的核酸序列。

8.如权利要求7所述的核酸分子，所述核酸序列选自：SEQ ID NO:45中第844至3051位构成的序列，SEQ ID NO:45中第1255至3051位构成的序列或SEQ ID NO:45中第1450至3051构成的序列。

9.权利要求7或8所述的核酸分子，所述核酸分子还包含编码AAV rep蛋白的AAV序列。

10.一种产生重组腺伴随病毒的方法，包括培养宿主细胞的步骤，所述宿主细胞含有(a)权利要求7所述的核酸分子；(b)功能性rep基因；(c)包含AAV反向末端重复序列和转基因的小基因；且具备(d)足够将小基因包装到AAV衣壳蛋白内所需的辅助功能。

11.一种宿主细胞，转染了权利要求7至9中任一项所述的核酸分子，所述转染体外进行。

12.一种组合物，包含生理相容性介质和至少一种重组腺伴随病毒(即重组AAV)，所述重组AAV包含AAVrh.8衣壳，所述衣壳由vp1蛋白、vp2蛋白和vp3蛋白构成，其中，所述vp3衣壳蛋白由SEQ ID NO:97中第203至736位的氨基酸序列构成，所述重组AAV还包含3’和5’AAV反向末端重复序列和与调节序列操作性相连的转基因编码序列，所述调节序列指导所述转基因编码序列在宿主细胞中的表达。

13.一种组合物，包含生理相容性介质和至少一种重组腺伴随病毒(即重组AAV)，所述重组AAV包含AAVrh.8衣壳，所述衣壳由vp1蛋白、vp2蛋白和vp3蛋白构成，其中，所述vp1衣壳蛋白由SEQ ID NO:97中第1至736位的氨基酸序列构成，所述重组AAV还包含3’和5’AAV反向末端重复序列和与调节序列操作性相连的转基因编码序列，所述调节序列指导所述转基因编码序列在宿主细胞中的表达。

14.一种分离或合成的核酸分子，它包含：(a)编码氨基酸序列如SEQ ID NO:97中第1至736位氨基酸所示的AAVrh.8vp1衣壳蛋白的序列，(b)功能性rep基因，(c)腺伴随病毒反向末端重复序列和转基因和(d)编码将腺伴随病毒反向末端重复序列和转基因包装到AAV衣壳蛋白内所需足够辅助功能的基因。