[发明专利]一种测定曲格列汀片中有关物质的方法

说明书

技术领域

本发明涉及分析化学领域，具体涉及一种测定曲格列汀片中有关物质的方法。

背景技术

在抗糖尿病药物中，口服给药的小分子化合物DPP-IV抑制剂研究最为活跃。DPP-IV是体内的一种酶，能够引发肠促胰岛素，即胰葡萄糖素样肽-1和葡萄糖依赖性促胰岛素多肽的失活，而这2种肠降胰岛素在血糖调节中发挥着重要作用。抑制DPP-IV能够增加血糖水平依赖性胰岛素分泌，从而控制血糖水平。

DPP-IV抑制剂类药物被命名为“列汀类”，此类药物共有17个，其中的曲格列汀由武田制药开发，于2014年首次在日本获批上市，是一种超长效的DPP-IV抑制剂，每周只需要口服一次，可产生持续的DPP-IV抑制作用，不仅降糖效果理想，同时具有不增加体重和不会引起低血糖反应等优越性。曲格列汀(Trelagliptin)化学名称为：2-[6-3-氨基-哌啶-1-基]-3-甲基-2，4-二氧代-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基甲基]-4-氟-苄腈。其化学结构式如下：

曲格列汀中的杂质主要有以下三个来源：一是本品原料合成过程中带入的起始原料、中间体和降解产物；二是原料合成反应中生成的副产物；三是产品在贮藏期间由于环境的影响会产生降解杂质。这些杂质会影响到药品的纯度和质量，需要建立有关物质的分析方法来控制这些杂质的含量。各杂质的名称和化学结构式如下。其中杂质V、Q、W、L、A与O为工艺杂质；杂质R和P为降解杂质，R在碱性条件和氧化条件下易生成，P在酸性条件下易生成。

中国专利申请(申请公布号CN104237421A)提供一种琥珀酸曲格列汀及其制剂的有关物质检测方法，采用二极管阵列检测器，该方法采用的色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，流动相A为磷酸盐缓冲液，流动相B为乙腈，且所述的磷酸盐缓冲液与乙腈的体积比为60∶40～85∶15，磷酸盐缓冲液的pH值为5.0～5.5，磷酸盐缓冲液的浓度为0.05～0.1mol/L，检测波长为278nm。其分析方法中水相组成复杂，包括缓冲盐和三乙胺，这些添加剂的加入会给分析方法带来较多不良的影响：不仅使色谱系统平衡较慢，同时也会对色谱柱的寿命带来影响；经过试验，发现有机相浓度需要达到至少60％乙腈才能将本品中所有杂质洗脱完全，但此专利公开的方法有机相浓度仅为40％。该专利采用278nm作为检测波长，经过实验发现，在此波长下杂质P没有任何紫外吸收。这些方面均表明，此前公开的分析方法不可能完全控制本品的质量。

发明内容

针对上述技术问题，本发明提供一种测定曲格列汀片中有关物质的方法，所述方法采用高效液相色谱法，将样品溶液注入高效液相色谱仪，完成曲格列汀片剂中有关物质的测定，色谱条件为：

色谱柱：以表面带电杂化颗粒的硅胶为填料的色谱柱；

流动相：流动相A为酸性水溶液，流动相B为有机溶剂，流动相A的体积百分比与流动相B的体积百分比的和始终保持为100％，进行线性梯度洗脱。色谱柱优选waters公司Xselect系列C18柱。

表面带电杂化颗粒可以提高低离子强度流动相条件下样品的载量和峰容量，Xselect系列色谱柱可为酸性、碱性和中性化合物提供很好的选择性。

进一步地，所述线性梯度如下：流动相B的起始比例为体积比3～5％，13min时升至体积比21～25％，20～24min时升至体积比70～80％。其中，起始比例优选体积比为3％、13min时优选体积比为21％、24min时优选体积比为80％。在24min后还可以添加一个过渡梯度，所述过渡梯度可以使流动相比例恢复至起始比例并冲洗至基线平稳。

进一步地，所述酸性水溶液中包含的酸为三氟乙酸、磷酸或高氯酸，酸性水溶液的pH值为1.5～4.0。其中包含的酸优选为磷酸。酸性水溶液的pH值优选为1.5～3.0，更优选2.0。

进一步地，所述有机溶剂为甲醇、乙腈、乙醇、四氢呋喃中的一种或者两种以上混合物。优选为甲醇或乙腈，最优选为乙腈。

进一步地，所述流动相的流速为1.0mL/min～1.5ml/min。优选为1.2mL/min。

进一步地，所述色谱柱的温度为25℃～40℃。优选为35℃。

进一步地，所述方法还包括检测波长，所述检测波长为220nm～230nm。优选为224nm。

进一步地，所述方法还包括进样量，所述进样量为10μL～50μL。