[发明专利]一种用于全悬浮培养MDCK细胞的无血清培养基

权利要求书

1.一种用于全悬浮培养MDCK细胞的无血清培养基，其特征在于：所述培养基由含NaCl 为5g/L的DMEM/F12培养基和以下组分组成：亚锡酸钠；重组人表皮细胞生长因子(EGF)；氢 化可的松；重组全链胰岛素；前列腺素(E1)；人转铁蛋白；甲状腺素(T3)；维生素E；胆固醇； 乙醇胺；β-巯基乙醇；吐温-80；HyPep1510；重组人血白蛋白ACF；甘露醇糖。

2.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于：所述培养基由含NaCl为5g/L的DMEM/F12 培养基和以下组分组成：

微量元素：

亚锡酸钠0.000001-0.00001g/L

生长因子：

重组人表皮细胞生长因子(EGF)0.00005-0.0005g/L

氢化可的松0.000012-0.00006g/L

重组全链胰岛素0.001-0.01g/L

前列腺素(E1)0.00001-0.00005g/L

人转铁蛋白0.002-0.008g/L

甲状腺素(T3)1-5×10^-10g/L

脂类复合物：

维生素E0.00001-0.0001g/L

胆固醇0.00001-0.0001g/L

乙醇胺0.0005-0.001g/L

β-巯基乙醇0.0005-0.001g/L

吐温-800.005-0.01g/L

植物水解物：

HyPep15101-10g/L

重组人血白蛋白：

ACF0.5-5g/L

其它：

甘露醇糖0.5-5g/L。

3.根据权利要求2所述的培养基，其特征在于：所述培养基由含NaCl为5g/L的DMEM/F12 培养基和以下组分组成：

微量元素：

亚锡酸钠0.000005g/L

生长因子：

重组人表皮细胞生长因子（EGF）0.0001g/L

氢化可的松0.000036g/L

重组全链胰岛素0.005g/L

前列腺素E10.000025g/L

人转铁蛋白0.0047g/L

甲状腺素(T3)4.0×10^-10g/L

脂类复合物：

维生素E0.00005g/L

胆固醇0.00005g/L

乙醇胺0.000925g/L

β-巯基乙醇0.000975g/L

吐温-800.00625g/L

植物水解物：

HyPep15105g/L

重组人血白蛋白：

ACF0.5-1g/L

其它：

甘露醇糖1g/L。

4.根据权利要求2或3所述的培养基，其特征在于：所述重组人血白蛋白ACF的浓度为 0.5g/L或1g/L。

5.权利要求1-4任一所述的培养基的制备方法，其特征在于：是将脂溶性原料乳化冻干 后与其它原料混合，磨细即得。

6.权利要求1-4任一所述的培养基的制备方法，其特征在于：将脂溶性原料乳化后（不 需要冻干）与其它原料依次溶解于注射用水，然后每升加入2200mgNaHCO₃，定容，最后用1N 氢氧化钠或1N盐酸调pH值至7.1-7.2，过滤除菌即得。

7.权利要求1-4任一所述的培养基在无血清全悬浮培养MDCK细胞中的应用。

8.应用权利要求1-4任一所述的培养基全悬浮培养MDCK细胞的方法，其特征在于：在权 利要求1-4任一所述的培养基中直接接种MDCK细胞，不添加血清，在37℃，120rpm的转速下 摇床培养。