[发明专利]基于牛血清白蛋白-纳米铂/铋的硫离子检测试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及以牛血清白蛋白-纳米铂/铋为模拟过氧化物酶的硫离子快速含量测定方法及试剂盒，属于分析化学和纳米技术领域。

背景技术

随着工业科技的飞速发展，环境问题变得越发严重。硫化物是造纸、石化、皮革等行业常见的化工原料和化学污染物，对水生态系统和人类健康均产生危害。在酸性条件下，硫化物转变为硫化氢，可危害细胞色素、氧化酶，造成细胞组织缺氧，甚至危及生命。同时硫化氢还腐蚀金属设备和管道，并可被微生物氧化成硫酸，加剧腐蚀性。硫化物易溶于水，因此，硫化物还是水体污染的重要指标之一，水体又与人们的日常生活紧密相关，所以建立一种快速、简易、实用的方法对于水体中的硫离子进行检测非常必要。目前，硫化物的检测方法主要包括电化学、色谱等。然而，这些方法需要复杂的样品预处理过程，处理过程相对费时，费用相对较大。

近年来基于铂纳米材料的生物传感器得到了广泛的关注，这些材料的模拟过氧化物酶催化活性高，催化效果好，抗干扰能力强，因此能够应用于各种生物检测领域，更重要的是这些材料大多可提供肉眼识别信号的比色法检测，具有简单，快速，适用于实时和现场检测等优点。

本发明利用牛血清白蛋白-纳米铂/铋与硫离子相互作用后其模拟过氧化物酶活性的变化，通过牛血清白蛋白-纳米铂/铋催化过氧化氢氧化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐显色，提供了一种快速、简便、灵敏的硫离子检测新方法及试剂盒检测试剂盒。

发明内容

本发明的一个目的是利用牛血清白蛋白-纳米铂/铋与硫离子相互作用后其模拟过氧化物酶活性的变化，通过牛血清白蛋白-纳米铂/铋催化过氧化氢氧化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐显色，提供了一种快速、简便、灵敏的硫离子检测新方法。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

本发明所述的基于牛血清白蛋白-纳米铂/铋的硫离子测定方法，其特征是在硫离子溶液中加入牛血清白蛋白-纳米铂/铋溶液，混合后室温静置，在混合溶液中加入过氧化氢，3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐，含有乙二胺四乙酸的磷酸盐缓冲溶液，混合后37℃温度温浴，根据652nm处的吸光度得到硫离子浓度；所述的牛血清白蛋白-纳米铂/铋是由如下方法制备的：在5mL浓度为50mg/mL的牛血清白蛋白水溶液中加入5mL浓度为16mmol/L氯铂酸溶液和0.5mL浓度为1.5mol/L氢氧化钠溶液，混匀后水浴80℃下反应2h，反应后溶液装入截止分子量为3k的超滤管，6000r/min离心超滤，并水洗3次，得到牛血清白蛋白-纳米铂水溶液，将牛血清白蛋白-纳米铂水溶液冷冻干燥得到牛血清白蛋白-纳米铂粉末，在0.6mL浓度为23.8mg/mL的牛血清白蛋白-铂水溶液中加入0.6mL浓度为0.5mmol/L的硝酸铋溶液和1.8mL浓度为10mmol/L，pH=7的磷酸盐缓冲液，混匀后水浴80℃下反应2.5h，反应后溶液装入截止分子量为3k的超滤管，6000r/min离心超滤，并水洗3次，得到牛血清白蛋白-纳米铂/铋的水溶液，将牛血清白蛋白-纳米铂/铋水溶液冷冻干燥得到牛血清白蛋白-纳米铂/铋粉末。

所述的牛血清白蛋白-纳米铂/铋与硫离子相互作用后其模拟过氧化物酶活性降低，催化过氧化氢氧化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐显色能力下降，催化反应产物在652nm处的吸光度减小。

所述的基于牛血清白蛋白-纳米铂/铋的硫离子测定方法，其特征是在0.4mL硫离子溶液中加入0.01mL浓度为4.76mg/mL的牛血清白蛋白-纳米铂/铋溶液，混合后在室温放置2分钟，在混合溶液中加入1mL浓度为2mol/L的过氧化氢，0.2mL浓度为16mmol/L的3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐，2.39mL含有乙二胺四乙酸的浓度为100mmol/L，pH=5的磷酸盐缓冲溶液，所述缓冲溶液中乙二胺四乙酸的浓度为4mmol/L，混合后37℃温浴10分钟，测定652nm波长处的吸光度，随着硫离子浓度的增大，吸光度逐渐减小。

所述的基于牛血清白蛋白-纳米铂/铋的硫离子测定方法，其特征是检测线性范围为0.08~4μmol/L，检测限为50nmol/L。

本发明采用以下具体技术方案：

（一）牛血清白蛋白-纳米铂/铋的制备：