[发明专利]一种基于螺环材料的胆固醇生物传感器的制备方法

权利要求书

1.一种基于螺环材料的胆固醇生物传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1，取洗净的导电基底，在其基底层(1)的导电面上均匀涂布介质层(2)，再在相对湿度为30％-40％、温度为18℃-28℃下干燥得半成品，其中介质层由螺环化合物的悬浮液与生物粘合剂溶液按照体积比1：1- 4混合涂布而成；

步骤2，配制0.5-20mg·mL^-1的胆固醇氧化酶溶液，取2-7μL的胆固醇氧化酶溶液均匀涂布在介质层上，再在相对湿度为30％-40％、温度为18℃-28℃下干燥形成酶层(3)，即完成生物传感器的制备；所述的螺环化合物为2-氰基螺[芴-9,9'-氧杂蒽]、2,7-二氰基螺[芴-9,9'-氧杂蒽]、2'-氰基螺[芴-9,9'-氧杂蒽]、2',7'-二氰基螺[芴-9,9'-氧杂蒽]、2,3',6',7-四氰基螺[芴-9,9'-氧杂蒽]、2'-氰基螺[二苯并[c,h]氧杂蒽-7,9'-芴]或2',7'-二氰基螺[二苯并[c,h]氧杂蒽-7,9'-芴]中任一种。

2.根据权利要求1所述一种基于螺环材料的胆固醇生物传感器的制备方法，其特征在于：步骤1中介质层由螺环化合物的悬浮液与生物粘合剂溶液按照体积比1：2混合后涂布而成。

3.根据权利要求1所述一种基于螺环材料的胆固醇生物传感器的制备方法，其特征在于：步骤1中所述的生物粘合剂为羧甲基纤维素、壳聚糖或全氟化膜。

4.根据权利要求1所述一种基于螺环材料的胆固醇生物传感器的制备方法，其特征在于，步骤2中胆固醇氧化酶溶液的配制分为两步：第一步，称取0.05-2mg的胆固醇氧化酶，溶于10μL，pH为5-9的磷酸缓冲液，得胆固醇氧化酶的储备液；第二步，取1μL的胆固醇氧化酶的储备液，加入9μL，pH为5-9的磷酸缓冲液制成。

5.根据权利要求4所述的一种基于螺环材料的胆固醇生物传感器的制备方法，其特征在于：第一步和第二步中所述磷酸缓冲液的pH均为7。