[发明专利]一种尿液HCG定量检测试纸条的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及免疫诊断领域，具体地说，特别涉及到一种尿液HCG定量检测 试纸条的制备方法。

背景技术

人绒毛膜促性腺激素(HCG)是妇女受精卵着床后由胎盘绒毛膜细胞分泌的 一种糖蛋白激素，可通过血液循环进入血液和尿液。HCG在受精后第6日开始 分泌，受精后第7日，就能在孕妇血清中和尿中测出，可用于早期妊娠的诊断。 至妊娠8～10周血清浓度达到高峰，约50000-20000mIU/L，持续10日后迅速下 降，持续至分娩。因此，还可根据尿液或血清中HCG的浓度，对妊娠正常与否 进行辅助诊断。

样本中待检抗原的含量很高时，过量抗原和金标抗体结合，与检测线位置 上的抗体不再形成"夹心复合物"。此时，如按常法测读，所得结果将低于实际的 含量，这种现象被称为HOOK效应(钩状效应)，因为标准曲线到达高峰后呈钩 状弯落。HOOK效应严重时，反应甚至可不显色，而出现假阴性的临床结果。 这在早孕试纸条中较常见，测试高值的HCG样品时，结果反而呈阴性。

市场上现有的HCG体外诊断试剂很多，包括定性和定量检测试剂，定量的 检测试剂主要包括放射性免疫方法，酶联免疫吸附方法，化学发光法和免疫荧 光法等，但定量试剂都需要配备专用的仪器，适合医院和诊所等，不适合患者 家庭自测。而定性的试纸条只能判断妊娠与否，无法满足妊娠后的监控。

目前，已有一些专利对HCG进行了定量的研究，在一定程度上，能满足患 者自测的需要。如CN203275417U通过利用数码相机和电脑，进行像素比较， 可测得HCG线性到600ng/ml(约12720mIU/ml)。专利CN203551567U涉及的 HCG浓度比较装置，对HCG浓度小于1000mIU/ml、约等于1000mIU/ml和大 于1000mIU/ml的样本，能进行初步的判断，无法对妊娠进行跟细致的判断。 CN2442271Y和CN2443378Y仅对HCG浓度小于25mIU/ml，HCG浓度在 25～1250mIU/ml之间，或者在1250～10000mIU/ml之间或者大于10000mIU/ml 的范围的样本进行了粗略的定量。上述几种方法多是通过质控线C包被羊抗鼠 IgG实现的，对样本的浓度只能定量在某个浓度范围内，而且该范围太宽，并且 没有对HOOK效应以上的浓度进行定量，因此对于大于15000mIU/ml的样本不 能定量，所以难以对妊娠进行详细的监控。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术中的不足，提供了一种检测尿液样本中 HCG浓度的胶体金免疫侧向层析试纸条，该试纸条用HCG抗原作为质控线， 发生的反应是质控线上的HCG抗原和与检测线反应后剩余的金标抗体。随样本 中HCG浓度的增加，检测线T出现典型的HOOK效应，而发生HOOK效应的 浓度范围，质控线C条带的颜色随之变浅。本发明通过T线和C线两个条带的 颜色变化，可实现对0-200000mIU/mL浓度范围的HCG尿液样本进行定量检测， 并避免了因HOOK效应而导致的假阴性现象，提高了临床诊断的准确度。

本发明所解决的技术问题可以采用以下技术方案来实现：

一种尿液HCG定量检测试纸条的制备方法，包括如下步骤：

1)划膜；

2)处理结合垫；

3)处理样品垫；

4)制备胶体金结合垫；

5)组装大卡；

6)切割装袋；

7)制备标准比色卡；其包括如下步骤：

先将HCG抗原标准品稀释，配置成系列浓度标准品，将试纸条标记MAX 线的一端浸入所述标准品，液面不得超过MAX线，待样本上到硝酸纤维素膜时， 将试纸放平，反应完毕后，利用像素分析软件分析一系列试纸条上的C和T两 个条带，模拟出与C和T两个色素相同的两个红色条带，从而得出一系列HCG 标准品浓度的标准比色卡。

进一步的，所述步骤1)的工艺为在带有背胶的PVC底板上粘贴硝酸纤维 素膜，然后用划膜仪将检测线T溶液和质控线C溶液同时划在在硝酸纤维素膜 上，烘干，切割，与干燥剂装袋，备用。

进一步的，所述一系列HCG标准品浓度的标准比色卡包括浓度为0、25、 50、100、250、500、1000、2500、5000、10000、25000、50000、100000和 200000mIU/mL的标准比色卡。