[发明专利]抑制肿瘤细胞增殖的多肽类似物和对应的编码cDNA及应用

说明书

本发明公开了一种抑制肿瘤细胞增殖的多肽类似物和对应的编码cDNA及应用。本发明基于肿瘤中核仁蛋白Nucleostemin(NS)与细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白(CKI)成员p27kip1(简称p27)相互作用结构域的确立，利用基因工程方法构建出了多肽类似物NS^118‑288aa。本发明多肽类似物能够直接结合p27，阻断NS蛋白和p27的相互作用，抑制NS蛋白对p27降解，从而发挥抑制肿瘤细胞的过度增殖的功能。可为肿瘤治疗靶点的探寻提供理论依据，对于应用于肿瘤的临床治疗具有十分重要的开发前景。

技术领域

本发明涉及多肽类似物，特别涉及一种抑制肿瘤细胞增殖的多肽类似物和对应的编码cDNA及应用。

背景技术

NS蛋白又称为鸟苷酸结合蛋白样3(guanine nucleotide binding protein-like3，GNL3)，其在胚胎发生、组织再生和肿瘤的发生等过程中均扮演重要的角色，NS蛋白的这些功能与其促进细胞周期进程的功能密不可分。NS蛋白的表达和肿瘤的恶性程度有密切的关系，干扰NS蛋白的表达可引起这些肿瘤增殖能力的普遍下降。因此，NS蛋白已成为防治肿瘤药物研制的重要靶点之一。

近年来有研究表明，NS蛋白可通过与抑癌基因相互作用，抑制抑癌基因的功能，促进肿瘤的发展。例如，NS蛋白与P53相互作用，使P53表达下调，可通过抑制P21基因的转录促进细胞的过度增殖，也可通过影响Bcl-2蛋白家族的功能而抑制凋亡，诱导肿瘤的产生。

p27是重要的细胞周期G1周期蛋白抑制因子，其可以结合CDK4-Cyclin D复合物，抑制后者的活性和细胞周期G1-S期转换，从而抑制肿瘤细胞的增殖。本专利公布的数据表明，肿瘤中，NS蛋白可与p27发生相互作用，促进肿瘤细胞中p27的降解。导致肿瘤细胞的过度增殖和发展。因此，阻断NS蛋白与抑癌基因p27的相互作用成为我们寻找抗肿瘤药物的新策略。

发明内容

本发明的目的是提供一种抑制肿瘤细胞增殖的多肽类似物及应用，至少能够解决上述问题之一。

为实现上述目的，根据本发明的一个方面，提供了一种抑制肿瘤细胞增殖的多肽类似物，其氨基酸序列如序列表SEQ NO.1所示：。抑制肿瘤细胞增殖的多肽类似物用于干扰NS蛋白与p27相互作用。

相应地，本发明还提供了上述抑制肿瘤细胞增殖的多肽类似物的应用，在制备抗肿瘤药物的应用。

相应地，本发明还提供了上述抑制肿瘤细胞增殖的多肽类似物的编码cDNA序列，其序列如序列表SEQ NO.1所示。

相应地，本发明还提供了上述抑制肿瘤细胞增殖的多肽类似物的编码cDNA序列的应用，在制备抗肿瘤药物的应用。

本发明的有益效果为：本发明基于肿瘤中核仁蛋白Nucleostemin(NS)与细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白(CKI)成员p27kip1(简称p27)相互作用结构域的确立，利用基因工程方法构建出了多肽类似物NS^118-288aa。本发明多肽类似物能够阻断NS蛋白和p27的相互作用，抑制NS蛋白对p27降解，从而发挥抑制肿瘤细胞的过度增殖的功能。可为肿瘤治疗靶点的探寻提供理论依据，对于应用于肿瘤的临床治疗具有十分重要的开发前景。

附图说明

图1、图1A为p27和NS蛋白进行免疫沉淀的免疫沉淀复合物检测实验结果图，图1B为免疫荧光分析NS蛋白和p27在肝癌细胞中的共定位情况；

图2、图2上部为NS蛋白的不同截断片段，图2下部为免疫沉淀结果检测图；

图3、步骤S102中重组真核表达载体图谱；

图4、步骤S102中HepG2细胞系中免疫印迹证明多肽的蛋白表达实验结果图；