[发明专利]131I标记的c(RGDyk)靶向阿霉素热敏纳米脂质体及其制备与应用

说明书

技术领域

本发明涉及医药技术领域，尤其涉及¹³¹I标记的c(RGDyk)靶向 阿霉素热敏纳米脂质体及其制备与应用。

背景技术

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，其传统的治疗方法是手术 切除结合放化疗。然而这一疗法对于早期乳腺癌效果较好，对于发现 较晚或者已发生转移的病人，则仅能以放化疗为主，其治愈率较低。 而传统的化学药物主要以被动运输的方式扩散至肿瘤细胞，细胞毒副 作用较大。随着脂质体技术的发展，一些研究发现将一些配体修饰在 脂质体的表面，通过其与肿瘤细胞或肿瘤新生血管细胞表面的过表达 受体相结合，从而靶向性运输药物到肿瘤细胞附近，有效的提高细胞 对药物的摄取能力，并且降低对正常组织的毒副作用。RGD(精-甘- 天冬氨酸，Arg-Gly-Asp)序列，能够与细胞表面的整合素相结合，从 而抑制血管新生。Pasqualin等人则发现含有二硫键的环RGD肽 (cRGD)对肿瘤新生血管内皮细胞的抑制作用是普通线形RGD肽 的10-200倍。通过将cRGD偶联至脂质体表面，使脂质体包裹的抗 肿瘤药物递送至肿瘤附近，可以特异性杀伤肿瘤细胞。近年来，新生 血管抑制剂与化疗药物联合治疗肿瘤，已经取得了良好的临床治疗效 果。

而肿瘤热疗为一项临床上广泛使用的治疗技术，通过利用物理能 量在人体组织中产生的热效应，使组织细胞的温度升高，进而加速肿 瘤细胞死亡的方法。然而对于位于身体内部较深部位的肿瘤热疗，由 于人体组织对电磁波具有反射作用，电磁波能量难以集中到肿瘤部 位，热效应分布不均匀，无法保证恒温，这些问题都限制了热疗在肿 瘤治疗中的应用。而研究者发现，脂质体形式的纳米药物可以在包裹 药物的同时搭载纳米级的Fe₃O₄粒子，对肿瘤进行热疗联合化疗，有 效的提高肿瘤杀伤率。研究者Jordan通过注射含有磁性纳米粒悬液的 C₃H大鼠乳腺癌移植瘤的肿瘤内，通过交变磁场(AMF)的局部照射， 磁性微粒吸收能量而升温至47℃，热疗效果显著，肿瘤得到了有效的 控制。

发明内容

鉴于以上问题，本发明的主要目的在于提供一种¹³¹I标记的 c(RGDyk)靶向阿霉素热敏纳米脂质体及其制备与应用。

本发明通过长循环脂质体为载体，包裹纳米级的Fe₃O₄粒子和阿 霉素，并以¹³¹I标记的c(RGDyk)修饰，将化疗、放疗、热疗组合到 一起，并对肿瘤组织进行靶向性治疗。

本发明采用如下技术方案：

本发明的¹³¹I标记的c(RGDyk)靶向阿霉素热敏纳米脂质体的结 构为：¹³¹I与c(RGDyk)相偶联，c(RGDyk)则通过DSPE-PEG-NHS活 化插入包裹阿霉素及磁性颗粒的脂质体的DPPC分子层中。

所述的c(RGDyk)是含有精-甘-天冬氨酸序列的环肽，其中含有精 -甘-天冬氨酸序列，并包含酪-赖氨酸，由酰胺键-成环，所述的赖氨 酸由其他氨基酸取代。

其化疗药物阿霉素由其他抗乳腺癌的水溶性药物替代，水溶性药 物包括吉西他滨或米托蒽醌。

本发明的¹³¹I标记的c(RGDyk)靶向阿霉素热敏纳米脂质体的制 备方法包括以下步骤：

(1)采用改良化学共沉淀法制备铁氧磁性纳米粒子：

在N₂气条件下将FeCl₂·4H₂O和FeCl₃·6H₂O按n(Fe²⁺)∶n(Fe³⁺)摩 尔比2-3：1溶于去离子水中，将浓度为0.4-1.0mol/L的氨水缓慢滴入该 溶液中，同时通过磁力搅拌混匀，通过水解产生黑色的晶体粒子，再 继续滴入氨水，调pH至8.0-10.0，使溶液呈碱性，加热使磁铁分散开， 离心并洗涤，将沉淀加入到酸性溶液中，在温度60-80℃下经胶溶化 处理得到棕色胶体溶胶；

(2)碘化反应：