[发明专利]青钱柳的指纹图谱检测方法

权利要求书

1.青钱柳的指纹图谱检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)供试品溶液制备

精密称定青钱柳药材粉末，置具塞锥形瓶中，加入10倍量体积浓度50％甲醇，超声提取30min，取出，取续滤液，分别用乙酸乙酯和正丁醇萃取，合并萃取液，减压蒸干，甲醇溶解，摇匀并离心，用0.22μm微孔滤膜滤过，即得青钱柳药材供试品溶液；

(2)对照品溶液的制备

精密称取山柰素对照品5.25mg，置于10mL容量瓶中，加甲醇溶解并定容摇匀，用0.22μm微孔滤膜滤过，即得0.525mg/mL山柰素的对照品溶液；

(3)高效液相色谱法测定青钱柳的对照指纹图谱

对10个批次的青钱柳药材的供试品溶液，进行高效液相色谱测定，测得各批次青钱柳药材的指纹图谱；

取山柰素对照品溶液进行高效液相色谱测定，测得山柰素对照品的色谱图；以山柰素色谱峰为内参照峰，计算出10批次青钱柳药材各供试品溶液中共有指纹峰的相对保留时间和相对峰面积，经国家药典委员会“相似度评价软件2004A”比较10批次钱柳药材供试品的色谱图和相对保留时间，以共有指纹峰作为青钱柳药材的对照指纹图谱；

(4)高效液相色谱法测定供试品溶液指纹图谱：将待测青钱柳药材供试品溶液按步骤(3)相同的色谱条件进样，测得供试品溶液的指纹图谱；

(5)将步骤(4)得到的供试品溶液指纹图谱和步骤(3)得到的对照指纹图谱用国家药典委员会“相似度评价软件2004A”评价；

步骤(3)和步骤(4)高效液相色谱测定的色谱条件为：

色谱柱为Merck C₁₈，规格为250mm×4.6mm，5μm，流动相：A相为乙腈，B相为0.1％磷酸溶液；梯度洗脱：0～11min，2％～13％A；11～16min，13％～18％A；16～50min，18％～31％A；50～62min，31％～42％A；62～82min，42％～89％A；体积流量：1.0mL·min^-1，柱温：35℃，进样量10μL，检测波长：245nm。

2.根据权利要求1所述的青钱柳的指纹图谱检测方法，其特征在于，青钱柳药材指纹图谱中有32个共有指纹峰。