[发明专利]一种金线莲种子采收后的处理方法

说明书

本发明公开了一种金线莲种子采收后的处理方法，包含采收后的保存及保存后的萌发两部分，所述采收后的保存是将成熟、未开裂的金线莲蒴果刮除表面微绒毛，经冲洗、消毒后，于装有变色硅胶的培养皿中脱水干燥，然后于灭菌离心管中收集金线莲种子，密封、低温保存；所述保存后的萌发是将密封保存的金线莲种子置于专用培养基中进行萌发。按本发明方法处理可有效保持种子活力，使金线莲种子得以长期保存，并显著提高种子的萌发率，种子存储2年后萌芽率仍可达80%以上，为金线莲种质资源的保存提供了一条有效的途径，也适用于兰科开唇兰属其他植物的种质资源保存。

技术领域

本发明属于农业科技领域，具体涉及一种金线莲种子采收后的处理方法。

背景技术

金线莲为兰科（Orchidaceae）开唇兰属（Anoectochilus Blume）多年生草本植物，是我国民间传统的珍贵药材，享有“药王”、“神草”、“鸟人参”等美称。金线莲以全草入药，味甘性平，具有清热凉血、祛风利湿之功效，主治咯血、支气管炎、肾炎、膀胱炎、糖尿病、乳糜尿、血尿、风湿性关节炎、小儿急惊风、毒蛇咬伤等。

金线莲对生长环境的要求很高，金线莲种子在自然环境下萌芽率不及万分之一，只有在适宜真菌侵染后才能萌发，且种子不宜存放，若经长时间存放萌芽率几乎为零，再加上人为过度采挖，使其野生资源濒临灭绝。近年来，国内外学者针对金线莲野生资源严重匮乏的现状，对金线莲的组织培养进行了大量研究，并已取得一定成效。无性繁殖虽然能够保持母本的优良特性，但是多代扩繁后容易出现种源退化现象，且与无性繁殖相比，利用种子进行有性繁殖利于基因交流，可使后代个体更富有活力和多样性，为金线莲新品种的选育提供了可能，也为种质资源保存及物种延续提供了有力的支持。

发明内容

本发明的目的在于提供一种金线莲种子采收后的处理方法，其能突破现有金线莲种子繁殖周期短的局限性，克服金线莲种子保存技术的不足，以长期有效的保存金线莲种子，显著提高种子的萌发率。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种金线莲种子采收后的处理方法，包含采收后的保存及保存后的萌发两部分，其操作包括以下步骤：

1）采收后的保存：

a. 消毒：于每年10-11月间采集成熟、未开裂的金线莲蒴果，刮除表面微绒毛，用清水冲洗30min，取出后在超净工作台上用质量浓度为75%的酒精消毒30s，再于质量浓度为0.1%的升汞中消毒20min，取出后用纯净水冲洗3-5遍；

b. 脱水干燥：用灭菌过的滤纸吸干金线莲蒴果表面水分，然后将金线莲蒴果置于无菌称量纸中，放入装有变色硅胶的培养皿中脱水干燥20-30d，至表皮开裂；干燥期间发现硅胶从深蓝色变成粉红色时要及时更换，以保证金线莲蒴果充分干燥；

c. 密封保存：将干燥至开裂的金线莲蒴果在无菌条件下，于灭菌离心管中收集其所含金线莲种子，密封后用蜡封口，并于4℃低温环境中保存；

2）保存后的萌发：将密封保存的金线莲种子置于专用培养基中进行萌发。

步骤1）所述装有变色硅胶的培养皿预先经120-130℃微波灭菌120s，然后取出，置于超净工作台中冷却；如此重复灭菌3-5次至变色硅胶呈深蓝色。

所用变色硅胶与金线莲蒴果的重量比为80-100:1。

步骤2）所述专用培养基为1/2MS +0.5mg/L NAA+0.7wt%琼脂+3wt%蔗糖+15wt%马铃薯提取液，调pH5.6-5.8。