[发明专利]脯氨酸耐受性三肽基肽酶及其用途

权利要求书

1.一种用于生产水解产物的方法，该方法包括：

(a)将至少一种蛋白质或其一部分与以下各项混合：

(A)至少一种内切蛋白酶；以及

(B)至少一种主要具有外切肽酶活性的脯氨酸耐受性三肽基肽酶或包含脯氨酸耐受性三肽基肽酶的发酵物，

其中一种所述肽酶

(a)由SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列组成；或(b)由SEQ ID No.57所示的核苷酸序列编码；

以及任选地另一种所述肽酶

(a)由SEQ ID No.1或SEQ ID No.2或SEQ ID No：29所示的氨基酸序列组成；或(b)由SEQ ID No.56所示的核苷酸序列编码；

并且

a’)所述脯氨酸耐受性三肽基肽酶能够从具有在P1处的脯氨酸的肽的N末端裂解三肽；或

b’)所述脯氨酸耐受性三肽基肽酶能够从具有在P1’处的脯氨酸的肽的N末端裂解三肽；并且

(b)回收该水解产物。

2.一种用于生产水解产物的方法，该方法包括：

(a)将至少一种选自由植物蛋白质、基于乳的蛋白质或蛋类蛋白质组成的组的蛋白质或其一部分与以下各项混合：

(i)至少一种内切蛋白酶；

(ii)S53家族的至少一种外切三肽基肽酶；以及

(iii)一种或多种氨基肽酶，并且

(b)回收该水解产物；

其中在(ii)中的三肽基肽酶是脯氨酸耐受性三肽基肽酶，且该脯氨酸耐受性三肽基肽酶主要具有外切肽酶活性，其中一种所述肽酶

(a)由SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列组成；或(b)由SEQ ID No.57所示的核苷酸序列编码；

以及任选地另一种所述肽酶

(a)由SEQ ID No.1或SEQ ID No.2或SEQ ID No：29所示的氨基酸序列组成；或(b)由SEQ ID No.56所示的核苷酸序列编码；

并且所述肽酶

a’能够从具有在P1处的脯氨酸的肽的N末端裂解三肽；或

b’)能够从具有在P1’处的脯氨酸的肽的N末端裂解三肽。

3.(i)至少一种内切蛋白酶、(ii)S53家族的至少一种外切三肽基肽酶、以及(iii)一种或多种氨基肽酶在从选自下组的至少一种蛋白质或其一部分制造水解产物中的用途，该组由以下各项组成：植物蛋白质、基于乳的蛋白质或蛋类蛋白质，该水解产物用于在倾向于对未处理的水解产物具有免疫反应的受试者中降低免疫原性或用于降低该未处理的水解产物的苦味；

其中在(ii)中的三肽基肽酶是脯氨酸耐受性三肽基肽酶，且该脯氨酸耐受性三肽基肽酶主要具有外切肽酶活性并且

其中所述肽酶

(a)由SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列组成；或(b)由SEQ ID No.57所示的核苷酸序列编码；

以及任选地另一种所述肽酶

(a)由SEQ ID No.1或SEQ ID No.2或SEQ ID No：29所示的氨基酸序列组成；或(b)由SEQ ID No.56所示的核苷酸序列编码；

并且所述肽酶

a’)能够从具有在P1处的脯氨酸的肽的N末端裂解三肽；或

b’)能够从具有在P1’处的脯氨酸的肽的N末端裂解三肽。

4.根据前述权利要求1-3中任一项所述的方法或用途，其中该至少一种蛋白质选自植物蛋白质。

5.根据权利要求4的方法或用途，其中所述植物蛋白质是麦醇溶蛋白、麦醇溶蛋白的免疫原性片段、谷物蛋白、谷蛋白、大豆蛋白中的一种或多种。

6.根据前述权利要求1-3中任一项所述的方法或用途，其中该至少一种蛋白质基于乳的蛋白质。

7.根据权利要求6所述的方法或用途，其中基于乳的蛋白质是酪蛋白；乳球蛋白；或乳清蛋白中一种或多种。

8.根据权利要求7所述的方法或用途，其中酪蛋白是β-酪蛋白和/或乳球蛋白是β-乳球蛋白。