[发明专利]使用时空转换的成像流式细胞仪

权利要求书

1.用于在流式细胞术中使颗粒成像的方法，其包括：

在携带含有颗粒的流体样品的流体通道传输光束，使得所述光束被所述颗粒散射或引起来自所述流体通道中所述颗粒的荧光发射；

在空间滤光器接收散射的光或荧光发射的光，所述空间滤光器包括具有多个孔的表面，所述孔以沿着与颗粒流相反的横向方向和与颗粒流平行的纵向方向的模式布置，使得流经所述模式的孔的颗粒的不同部分在不同时间通过不同的孔，并在与所述孔相关的位置散射光束或发射荧光；

基于来自携带所述流体样品的流体通道的至少一些所接收的散射的光或发射的荧光，编码包括所述颗粒的时空信息的光信号；

通过光检测器检测编码的光信号；以及

在与所述光检测器通信的数据处理单元处理检测到的光信号，以产生与流过所述流体通道的颗粒相关的图像数据，其中所产生的图像数据包括所述颗粒的物理特征的信息。

2.如权利要求1所述的方法，其还包括：

基于所产生的图像数据形成所述颗粒的图像，其中所述图像包括所述颗粒的物理特征的视觉呈现。

3.如权利要求1所述的方法，其中当所述颗粒在所述流体通道中流动时，处理检测到的光信号是实时的。

4.如权利要求1所述的方法，其中处理检测到的光信号包括：

在至少两个维度上确定所述颗粒的位置或速度；

确定所述空间滤光器的特征函数，所述特征函数包括与所述模式的孔的尺寸和布置相关的参数；以及

通过用确定的特征函数对颗粒信号进行去卷积，来确定与所述颗粒的一个或多个部分相关的局部信号，从而产生与所述颗粒相关的图像数据，其中所述颗粒信号包括所检测到的光信号、所确定的位置或速度、在所述空间滤光器聚焦所接收的散射的光或荧光发射的光的光学系统的放大倍数。

5.如权利要求1所述的方法，其还包括：

基于所述颗粒的确定的物理特征来分选所述颗粒。

6.如权利要求1所述的方法，其中在所产生的图像数据中所述颗粒的物理特征包括以下的至少一种：所述颗粒的尺寸、所述颗粒的空间特征或几何形状、或所述颗粒的内部特征的位置或浓度。

7.如权利要求1或6所述的方法，其中所述颗粒包括生物细胞。

8.如权利要求7所述的方法，其中所产生的图像数据包括所述生物细胞中的内部细胞器、细胞核或寄生物质的荧光模式的空间分布数据。

9.如权利要求1所述的方法，其中所产生的图像数据包括由于所述颗粒的形状和密度分布引起的所述颗粒的散射模式数据。

10.如权利要求1所述的方法，其中孔的模式包括两个或更多个分开放置的狭缝，使得相邻的狭缝位于狭缝的在所述流体通道中颗粒流的纵向方向(y-方向)和与所述纵向方向垂直的横向方向(x-方向)的覆盖区之外。

11.如权利要求10所述的方法，其中孔的模式包括10个100μm x1mm的狭缝。

12.如权利要求1所述的方法，其中孔的模式包括狭缝组，其中每组狭缝包括两个或更多个平行的狭缝阵列，其在所述流体通道中颗粒流的纵向方向(y-方向)为移动的、空间分开的和非重叠的。

13.如权利要求1所述的方法，其还包括：

通过位于散射的光或荧光发射的光的光路和所述光检测器的成像平面中的第二滤光器，编码所述光信号中的频率信息，所述第二滤光器包括频率调制孔的模式，所述频率调制孔包括具有存在间隔的平行的狭缝阵列的两组或更多组狭缝，以便相对于各组产生不同的周期。

14.如权利要求1所述的方法，其中所述光束包括激光束。