[实用新型]一种实时荧光定量PCR仪

说明书

技术领域

本实用新型涉及生化设备领域，具体是一种实时荧光定量PCR仪。

背景技术

PCR(聚合酶链式反应)是指利用DNA在体外95℃的高温时会变性成单链、低温60℃左右时该单链会 与引物按碱基互补配对的原则结合、在调温度至DNA聚合酶最适反应温度72℃左右时DNA聚合酶会沿着磷 酸到五碳糖(5’-3’)的方向合成互补链的性质，实现放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术。而PCR 仪则是在变性温度、复性温度、延伸温度之间实现很好的控制，使特定DNA的扩增得以实现的设备。为了 能够实时监控反应过程，进而及时调整温度，需要PCR仪在温控的同时监测靶基因。

传统的PCR检测方法是通过将扩增产物进行凝胶电泳来判断靶基因是否存在，但是该方法存在诸多不 足：由于PCR扩增的效率很高，靶基因从极少量扩增至大量并最终达到饱和的时间较短，电泳检测只能得 到特定基因是否存在的定性结果，而无法区分上述过程，也无法对其数量或浓度定量检测，同时，该方法 操作过程复杂，检测时间长，无法满足实时监控反应过程的要求，另外，由于在操作过程中需要将检测样 本转移，因此样品容易受环境的污染，进而造成检测结果不准确。

为了解决上述问题，出现了实时荧光定量PCR技术，例如，中国专利文献CN101699271A公开了一种 实时荧光定量PCR激发检测系统，该系统基于可调谐滤光片实现全波长荧光激发及检测，该系统包括由光 源、聚光装置和第一可调滤光片组成的荧光激发模块；由第二可调滤光片、光检测器和光电转换装置组成 的荧光检测模块；由波长调谐设备及主控计算机组成的控制单元；有反应试管、金属温块及恒温热盖组成 的热循环系统。上述系统在DNA扩增反应中，通过荧光信号对PCR进行实时检测，并经数据处理对靶基因 进行定量分析，操作简单，能够自动、快速的完成对靶基因的定量检测，并且在检测过程中不受环境污染， 检测结果较为准确。但是，上述实时荧光定量PCR激发检测系统以及目前其他的实时荧光定量PCR仪均在 温度控制方面还存在缺陷：一方面，在反应的某一阶段，保持在某一特定的温度状态时，需要PCR仪具有 良好的温度均一性；另一方面，在实时监控反应过程中，需要在适当时机及时调整温度，这进一步要求PCR 仪可以迅速调整温度，并在较短的时间内达到温度的均一性；上述实时荧光定量PCR激发检测系统以及目 前其他的实时荧光定量PCR仪的温度均一性最优仅能达到±0.1℃，即虽然能够实时检测反应过程，却不 能很好的实现温度控制，而对于PCR来说，反应是一个动态竞争的过程，反应温度和时间决定了哪个产物 能够胜出，因此，上述缺陷导致了其不能实现检测样品多位点突变、单核苷酸多态性-SNP、基因分型等多 种分析功能。

实用新型内容