[实用新型]一种无需搅拌器的快速分离人体皮肤表皮细胞的装置

说明书

技术领域

本发明涉及医学细胞治疗领域，具体涉及一种无需搅拌器的快速分离人体皮肤表皮细胞的装置。本发明分离的细胞可用于瘢痕整形、各种原因所致色素异常改变(如白癜风、瘢痕性色素减退及色素沉着)的治疗及多种急慢性创面(如烧伤、皮肤软组织挫伤、静脉曲张性皮肤溃疡)的修复。

背景技术

近年来，细胞及干细胞治疗已成为多种疑难疾病的重要治疗方法之一，已越来越广泛地应用于临床。分离、培养人体皮肤中的表皮细胞已应用于大面积烧伤创面修复、色素异常改变性疾病如白癜风等的治疗，并取得了较理想的效果。例如：分离小块人皮肤中表皮细胞，不经体外培养直接喷洒于清创后的烧伤创面可显著缩短创面愈合时间、减轻瘢痕形成。

尽管人体皮肤表皮细胞的应用取得了一定效果，然而尚难以在临床广泛推广应用。存在的主要问题是目前尚无简便、快速的表皮细胞分离设备和技术。常用的方法是切取患者小块皮肤组织后采用中性蛋白酶或胰蛋白酶进行消化，第一步是分离皮肤组织的表皮层，可采用热消化或冷消化。热消化是将皮肤组织置于由中性蛋白酶或胰蛋白酶组成的消化液中，在实验室培养箱等清洁环境下于37摄氏度消化0.5-2小时，然后以摄子揭起表皮层。冷消化是指在4摄氏度下将皮肤组织消化8-12小时，然后以摄子揭起表皮层。第二步是分离表皮层中的细胞成份，将分离的表皮层剪切成碎片，加入一定浓度的胰蛋白酶溶液，在37摄氏度下消化10-45分钟不等，然后以100目或200目滤网过滤去除表皮碎片，加入0.5-1ml异体或异种 血清中和胰蛋白酶，离心机上以600-1500rpm离心5-10分钟，吸除溶液，在沉淀物中加入培养基或其它电解质溶液，适当吹打，获得含表皮细胞为主要细胞成份的悬液(参见文献：郑志忠，侯兰娣。人表皮角朊细胞的分离，培养和鉴定。中华皮肤科杂志，1990，23(3)：156-158)。上述方法存在的主要问题如下：1.操作过程时间长：无论是热消化或冷消化，整个细胞分离过程需耗时3-22小时，分离的细胞难以在短时间内应用于临床治疗；2.步骤多而较复杂：需首次消化以分离表皮层、再次消化以分离表皮层中的表皮细胞，然后过滤、离心、重悬分散细胞等，操作过程多而相对复杂、需一定的仪器设备及相关技术，只能在具备一定实验条件的场所如实验室内进行，且需相关技术人员进行操作，难以广泛推广应用；3.存在过敏及病毒、支原体、衣原体等病原微生物传播的危险：分离细胞时残余部分胰蛋白酶，需添加胰蛋白酶抑制剂或异体(种)血清，中止胰蛋白酶活性以免加重细胞损伤，血清成份复杂，可导致过敏甚至过敏性休克等严重并发症，且存在难以检测的病原微生物传播的风险；4.所采用的分离方法据各实验室的条件及经验均有所不同，缺乏统一的流程和质控标准，分离的表皮细胞活性、移植后存活情况不稳定。

综上所述，常规的人体皮肤表皮细胞分离方法操作步骤多、耗时长，需专用仪器设备及具有一定经验的技术人员操作，严重限制了人皮肤表皮细胞治疗的推广应用。目前急需一种简便、快速、安全性高的人皮肤表皮细胞的专用分离设备及分离方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种简便、快速、安全的人体皮肤表皮细胞的 专用分离设备。

本发明拟对目前常规使用的人皮肤表皮细胞分离设备进行改进和创新，不仅要减少、简化表皮细胞分离的步骤和所需仪器设备，而且显著缩短表皮细胞分离的时间，同时要避免血清的应用，提高细胞治疗的安全性。

本发明提供了一种无需搅拌器的快速分离人体皮肤表皮细胞的装置，该装置主要包括：

细胞分离操作板，其表面可为水平面结构，可为圆形、长方形、正方形等任意形状，面积大小为20平方厘米-2500平方厘米。细胞分离操作板开设有2个及以上孔体，其中至少一个孔体为漂洗孔，其余各孔体中至少有一个为过滤孔。优选地，每一漂洗孔的形状可为圆形、正方形或其它任意形状，直径优选为0.5-5cm，深度为0.5-5cm，每一漂洗孔内置有等渗电解质溶液；更为优选地，每一过滤孔内置有等渗电解质溶液以及可抽取式40目～600目的过滤网，且过滤孔的直径优选为0.2～5cm，深度优选为0.2～5cm；更为优选地，细胞分离操作板表面临近过滤孔处以斜面方式连接至过滤孔的一边侧，斜面相对于水平面的角度优选在5-80度之间；