[发明专利]基于原位实时光谱在线监测蛋白质酶解过程的装置和方法

权利要求书

1.基于原位实时光谱在线监测蛋白质酶解过程的方法，其特征在于按照下述步骤进行：

（1）对谷朊蛋白进行酶解，酶解过程定时取样，化学方法监测其酶解过程；

（2）取样的同时，在反应池中对酶解液快速的采集其原位实时近红外光谱；

（3）光谱预处理；

（4）最佳光谱区间的筛选；

（5）模型建立和预测；

（6）利用上述预测模型对蛋白质酶解过程进行原位实时预测；

其中步骤（1）所述的谷朊蛋白酶解为底物浓度为20-50 g/L谷朊蛋白悬浮液，加酶量6460 U/g，酶解温度50℃、酶解时间0-80 min；酶解过程指标为谷朊蛋白水解度、酶解液中多肽的浓度和酶解液的ACE抑制率；

其中步骤（2）所述对酶解液快速的采集其原位实时近红外光谱是指使用NIRQUEST256-2.5型近红外微型光谱仪结合TP300透射浸入式光纤探头采集酶解过程中酶解液的近红外光谱，采用对近红外光灵敏度最高的铟砷化镓检测器，

其中步骤（3）所述的光谱预处理为一阶导数、二阶导数、标准化归一化处理（SNV）、多元散射校正（MSC）处理方法进行预处理；

其中步骤（4）所述的最佳光谱区间的选择是指采用联合区间最小二乘回归方法（Si-PLS）对DH、多肽浓度和ACE抑制率的最佳光谱区间进行选择；

其中步骤（5）所述的模型建立和预测是指将样品集分为校正集59个，预测集29个，采用联合区间最小二乘回归方法（Si-PLS）建立校正和预测模型；

其中步骤（6）所述的，利用上述预测模型对酶解过程进行原位实时监测是指，对建模外的一个酶解过程进行原位光谱的监测，预测酶解过程中的DH，酶解液的多肽浓度及ACE抑制率，比较预测值和实测值，计算残差，即可对蛋白质酶解过程进行原位实时预测。