[发明专利]快速生产白及种苗的方法

说明书

本发明公开了一种快速生产白及种苗的方法，将白及种子与白及菌根真菌进行液体共培养至白及种子萌发，以及将萌发的白及种子进行白及种苗培养，其中，所述白及菌根真菌为蜡壳菌目(Sebacinales sp.)菌根真菌菌株YY‑51，所述白及菌根真菌于2015年7月31日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏号为GCMCC NO.11104。本发明制作的白及人工种子或种苗，容易保藏和运输，避免了传统组织培养过程中的操作过程复杂、技术要求高、多次继代培养、移栽或定植过程需要大量人力和物力，生产成本低。

技术领域

本发明涉及生物技术领域。更具体地说，本发明涉及一种快速生产白及种苗的方法。

背景技术

兰科植物种子细小如尘，也称为“灰尘种子”，其种子海量，每一颗成熟的果实包含数万粒以上可利用的种子，但在自然条件下，种子很难萌发。兰科植物是植物界进化程度高，且与真菌有着密切联系的特殊生态类群。研究表明，无论是兰科植物的种子萌发，还是植物的生长，都离不开菌根真菌；菌根真菌在兰科药用和观赏类植物的保护、引种驯化和人工栽培中显得尤为重要。由于大多数兰科植物处于濒危状态，所有兰科植物的野生种都已被列入《濒危野生动植物国际贸易公约》，是植物保护中的“旗舰”类群。因此，如何在生产中有效地利用菌根真菌，已成为兰科植物大规模人工栽培、引种驯化和资源再生及保护的关键限制性因子。

白及为兰科多年生草本植物，其花色艳丽，极具观赏价值，还是目前我国濒危紧缺的中药材，其根茎中富含药用成分白及胶质，具有治疗肺结核咯血、支气管扩张咯血、胃溃疡吐血、尿血、便血等作用，疗效确切，经济价值很高。但由于自身特殊的生理特点及其生态环境受到严重破坏，其资源几近枯竭。因此，如何实现白及资源的保护与资源再生，是一个重要而急切的课题。

目前，白及的繁殖方法主要有根茎分株繁殖和组织培养。传统的根茎分株繁殖速度慢，生长周期长，效率低，种苗成本高，很难满足大面积的栽培需求；而组织培养生产的无菌试管苗生长缓慢、移栽成活率低、抗逆性差、易感染病原菌。从目前情况看，白及繁殖困难的状况还没有得到根本解决，导致野生白及资源几近枯竭，市场供不应求，严重限制了白及临床用药和工业生产的需求。

现有技术中，尚未有关于菌根真菌与兰科植物种子液体共生培养的报道。本技术应用于白及种苗的快速生产及提高种苗的移栽成活率，同时可大幅降低生产成本，对于推广白及规模化种植物，提高白及药材的质量和产量，保护白及资源具有重要的现实意义和应用价值。

发明内容

本发明的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。

本发明还有一个目的是提供一种快速生产白及种苗的方法，通过将白及种子接种于白及菌根真菌菌丝的菌液中共生培养，然后通过对共生培养得到的共生混合体进行包埋处理，制作得到类似于人工种子的白及种苗，播种于育苗盘，接菌处理的种子在白及菌根真菌作用下萌发形成具有根茎叶的完整植株。

为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一株白及菌根真菌，所述白及菌根真菌为蜡壳菌目(Sebacinales sp.)菌根真菌菌株YY-51，所述白及菌根真菌于2015年7月31日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏号为GCMCC NO.11104。

本发明所述的快速生产白及种苗的方法，包括以下步骤：

步骤一、菌液的制备：采用PDA固体培养基培养白及菌根真菌，然后将白及菌根真菌接种至共生液体培养基中得到白及菌根真菌菌丝体的菌液；

步骤二、共生混合体的制备：将经过预处理的白及种子接种至步骤一中得到的菌液中，在摇床上进行共生培养，得到白及种子和白及菌根真菌的共生混合体；