[发明专利]丹酚酸B纳米制剂的用途

说明书

技术领域

本发明涉及一种丹酚酸B纳米制剂的新用途。

背景技术

丹酚酸B是丹参主要水溶性有效成分之一，又称为丹参酸B。丹酚酸 B(SalvianolicacidB，SalB)是一种具有如下结构式所示的的化合物，可从唇形 科植物丹参(SalviamiltiorrhizaBunge)的干燥根中提取获得，产品外观为棕黄色 干燥粉末，味微苦、涩，可溶于水、乙醇或甲醇等溶液

丹酚酸B作为丹参中的主要水溶性成分，在治疗心血管疾病、慢性肝炎、 抗肝纤维化、抗动脉粥样硬化和改善记忆功能障碍等方面发挥着重要作用。现代 中医药将丹参药物制备成各种剂型药物，如胶囊、滴丸、片剂或注射剂等，用于 活血化瘀、理气止痛、因瘀血阻滞经络所致缺血性中风、虚弱无力、拘挛疼痛或 运动不遂，口眼歪斜等病症。

发明内容

本发明的目的是提供一种丹酚酸B纳米制剂抑制头颈肿瘤细胞系HN13和 HN30及白斑细胞系Leuk1的生长、阻滞细胞增殖周期及促进细胞凋亡的用途，为 预防或治疗口腔头颈肿瘤或口腔黏膜白斑病症提供一种新的药物。

本发明采用丹酚酸B纳米制剂技术促进细胞对药物的摄取率，所述丹酚酸B 纳米制剂如文献QiangPeng,Zhi-RongZhang,XunSun,JiaoZuo,DongZhao,and TaoGong.MechanismsofPhospholipidComplexLoadedNanoparticlesEnhancing theOralBioavailability[J].MolecularPharmaceutics.2010.VOL.7,NO.2,565–575 中公开方法制备获得或其他现有技术公开方法制备获得。

本发明将通过激光共聚焦显微镜观测单纯药物丹酚酸B(SalB-Free)和丹酚 酸B纳米制剂(SalB-PLC-NPs)对Leuk1、HN13和HN30细胞定性摄取的差异。

荧光分光光度计分析研究单纯药物丹酚酸B(SalB-Free)和丹酚酸B纳米制 剂(SalB-PLC-NPs)对Leuk1、HN13和HN30细胞定量摄取的差异。

MTS方法研究比较单纯药物丹酚酸B(SalB-Free)和丹酚酸B纳米制剂(Sal B-PLC-NPs)对Leuk1、HN13和HN30细胞增殖抑制作用的差异。

同时用流式细胞仪来分析比较单纯药物丹酚酸B(SalB-Free)和丹酚酸B纳 米制剂(SalB-PLC-NPs)对Leuk1、HN13和HN30细胞周期阻滞作用的差异及诱 导细胞凋亡作用的差异。

附图说明

图1激光共聚焦显微镜观测细胞定性摄取示意图。

图2荧光分光光度计分析细胞定量摄取作用示意图。

图3MTS方法检测观察药物对细胞增殖抑制作用示意图。

图4流式细胞仪检测分析细胞周期阻滞作用示意图。

图5AnnexinV-PI实验细胞凋亡率示意图。

具体实施方式

除非另有定义，本发明使用的所有技术和科学术语的含义与本发明所属技 术领域普通技术人员通常理解的含义相同。通常，本发明使用的命名及下述实验 方法都是本领域公知的或常用的，若未特别指明，本发明实施例中所用的试剂或 实验材料均可市售获得。为了使本发明所解决的技术问题、技术方案及有益效果 更加清楚明白，以下结合具体实施例，对本发明作进一步的说明。

本发明实施例中所使用的细胞分别为头颈肿瘤细胞系HN13和HN30细胞 和白斑细胞系Leuk1细胞。

实施例1：

细胞培养液成分及含量为：HN13和HN30用DMEM培养液(型号C40306， 购于上海源培生物科技股份有限公司)培养，每瓶500ml的培养液加入50ml的 胎牛血清(Gibco,USA,26140-079)，并加入青霉素和链霉素浓度均为 100units/ml；Leuk1用K-SFM培养液(GIBCO,GrandIsland,NY,USA)培养，使 用前加入1支产品包装中的表皮生长因子，避光4℃冰箱保存。