[发明专利]一种鉴别不同产地麦冬的方法在审
申请号: | 201510881864.3 | 申请日: | 2015-12-04 |
公开(公告)号: | CN105388228A | 公开(公告)日: | 2016-03-09 |
发明(设计)人: | 陈莉;朱子微;宓寅筱;叶虹;王木兰;李梅 | 申请(专利权)人: | 正大青春宝药业有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06 |
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地址: | 310023 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 鉴别 不同 产地 麦冬 方法 | ||
技术领域
本发明涉及一种麦冬产地的鉴别方法,包括利用特征性成分鉴别两种不同产地麦冬的方法和该特征性成分的含量测定方法,具体地说是利用龙脑次苷鉴别麦冬产地的方法和龙脑次苷的含量测定方法。
技术背景
麦冬又称麦门冬,为百合科植物麦冬Ophiopogonjaponicus(L.f)Ker-Gawl.的干燥块根。具有养阴生津、润肺清心之功效。用于肺燥干咳,阴虚痨嗽,喉痹咽痛,津伤口渴,内热消渴,心烦失眠,肠燥便秘。为常用大宗中药材之一。麦门冬始载于《神农本草经》,列为上品,此后历代本草均有记载。根据历代本草记载和现代麦冬的产销情况,麦冬形成两大道地药材,即浙麦冬(又称杭麦冬)和川麦冬,且历代本草均认为浙麦冬质量最佳,川麦冬次之。
浙麦冬主产于浙江省的杭州附近和慈溪,以杭州笕桥所产为最佳。浙麦冬的采收年限一般为三年。川麦冬主产区四川绵阳地区的三台县,采收年限为一年,且产量高于三年生的浙麦冬。根据《中国药典》和现代植物分类学文献,浙麦冬和川麦冬为同一种植物,但根据两个产地的植物形态观察和化学成分分析,二个产地的麦冬不管是植物形态特征、生长状况还是从化学成分,均存在着明显的差别。目前已上市的参麦注射液所选取的麦冬药材产地不同,却没有标明其所用的麦冬其产地为何。
文献显示,麦冬中含有多种有效成分,主要为皂苷类和黄酮类(长春中医学院学报,麦冬化学成分及药理作用的研究现状),然而发明人发现上述两类成分均难以被鉴别或不具有特征性。目前已有文献报道,使用龙脑苷鉴别参麦注射液中的麦冬成分(CN200910155685.6),但是对于两个不同产地的麦冬到目前为止没有行之有效的鉴别方法。
龙脑次苷首次发现是浙麦冬中,在1983年,金田宣等(金田宣等.StudiesontheComponentsofOphiopogonRoots(China).I[J].Yakugakuzasshi.1983,103(11):1133-1139.)从20kg的浙麦冬(OphiopogonjaponicusKer-Gawler)中分得龙脑次苷300mg,得率为300mg/20kg。常规条件下根本无法检测到其存在,但是龙脑次苷又是麦冬的重要活性成分,有保护心肌细胞凋亡、促进心肌内皮细胞NO释放和抗低密度脂蛋白酶氧化等作用,故目前急需一种快速,简便的龙脑次苷检测方法用于鉴别麦冬产地。
发明内容
本发明提供一种麦冬产地的鉴别方法,包括通过检测龙脑次苷鉴别麦冬产地的方法和麦冬药材中龙脑次苷的含量测定方法。
本发明针对目前龙脑次苷含量测定方法的缺失,提供了一种行之有效的测定方法,可用于鉴别不同产地的麦冬药材。
本发明对麦冬原药材进行不同条件的提取浓缩后,采用高效液相色谱法检测龙脑次苷的含量,并且根据龙脑次苷的含量鉴别麦冬药材的产地。
具体方法如下:
(1)制备待测样品:将浙麦冬药材粉碎后过10目筛,精密称定150g,加溶剂500mL,提取0.2~3小时,滤过,减压浓缩至近干,残渣加甲醇溶液20mL,滤过,取续滤液作为供试品溶液。
(2)制备对照品:精密称取龙脑次苷对照品(纯度:98.08%)35.38mg,,置100mL量瓶中,加甲醇溶解并定容至刻度,摇匀,即得。
(3)含量测定:将待测样品注入高效液相色谱仪进行检测,色谱条件为:色谱柱为C18柱(250×4.6mm,5μm),蒸发光散射检测器;流动相为乙腈-水(28:72)混匀;流速1.0ml/min;柱温35℃;检测条件:漂移管温度40℃;氮气压力3.5L/min。
进一步,所述步骤(1)中,所述溶剂优选甲醇,乙醇,乙酸乙酯,水,氯仿,和正丁醇。
所述步骤(1)中,所述提取方法优选超声处理0.2~3小时或者加热回流0.2~3时。
进一步,所述步骤(1)中,所述提取方法优选加热回流0.5-2小时。
本发明方法中,提取浓缩后产生大量糖浆状混悬物,无法完全干燥,加入甲醇后无法得到浓度均匀的供试品溶剂,且含量极低,为提高龙脑次苷的含量,优选步骤(1)溶剂为甲醇:氯仿=1~9:1。
进一步,所述步骤(1)中,所述溶剂优选甲醇:氯仿=1~3:1。
使用上述方法,发明人通过不同渠道,收集了大量不同种植基地、不同采收时间的两种产地的麦冬,对多批次的浙麦冬与川麦冬进行分别测定,发现龙脑次苷只有在浙麦冬存在,川麦冬中检测不到龙脑次苷的存在,使用龙脑次苷作为麦冬药材中的指标性成分进行鉴别是行之有效的方法。
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