[发明专利]HPLC测定原料苯磺顺阿曲库铵含量的方法

说明书

技术领域

本发明属于药物分析领域，具体涉及一种HPLC测定原料苯磺顺阿曲库铵含量的方法。

背景技术

2010版药典测定苯磺顺阿曲库铵含量的高效液相色谱法的色谱条件为：用十八烷基键合硅胶为填充剂；以1.02％磷酸二氢钾缓冲溶液(用磷酸调节pH至3.1)-甲醇-乙腈(75:5:20)为流动相A，以1.02％磷酸二氢钾缓冲溶液(用磷酸调节pH至3.1)-甲醇-乙腈(50:30:20)为流动相B，按梯度进行洗脱；检测波长为280nm。

该方法采用的是梯度洗脱，要求仪器脱气效果好，色谱柱耐高压。并且该方法用时较长，单针进样需用时60min，由此流动相用量也会相应加大，可谓费时耗财。

发明内容

发明目的：为了解决现有技术的不足，本发明提供了一种HPLC测定原料苯磺顺阿曲库铵含量的方法，解决苯磺顺阿曲库铵含量检测耗时过长的问题，同时兼顾简化配制流动相工序，节约流动相消耗，降低检验成本。同时提高了高效液相色谱仪和色谱柱的使用寿命等问题。

技术方案：一种HPLC测定原料苯磺顺阿曲库铵含量的方法，包括如下步骤：

(1)进样重复性

精密称取苯磺顺阿曲库铵对照品10mg，置25ml量瓶中，加流动相定容至刻度，摇匀，作为供试品溶液，精密量取供试品溶液20μl，注入液相色谱仪，重复进样5次，记录色谱图；

(2)系统适应性

精密称取苯磺酸阿曲库铵对照品10mg，置100ml量瓶中，加流动相定容至刻度，摇匀，作为系统适应性溶液，同法配制六份，精密量取系统适应性溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图；

(3)溶液稳定性

精密称取苯磺顺阿曲库铵对照品10mg，置25ml量瓶中，加流动相定容至刻度，摇匀，作为供试品溶液，将供试品溶液在进样盘-4℃条件下放置，分别于0h、2h、4h、6h、8h、10h、12h，精密量供试品溶液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图；

(4)检测限定量限

精密称取苯磺顺阿曲库铵对照品10mg，置25ml量瓶中，加流动相定容至刻度，摇匀，作为供试品溶液，逐级稀释，直至信号与噪音的比值约为3:1，即为检测限浓度；

精密称取苯磺顺阿曲库铵对照品10mg，置25ml量瓶中，加流动相定容至刻度，摇匀，作为供试品溶液，逐级稀释，直至信号与噪音的比值约为10:1，即为定量限浓度，同法配制六份；

精密量各供试品溶液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图；

(5)回收率

对照品溶液：取苯磺顺阿曲库铵对照品10mg，精密称定，置25ml量瓶中，加流动相定容至刻度，摇匀，即得；同法配制两份；

苯磺顺阿曲库铵贮备液：取取苯磺顺阿曲库铵对照品约20mg，精密称定，置25ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀；

供试品溶液：取贮备液4ml、5ml、6ml各三份，置10ml量瓶中，加流动相溶解并定容至刻度，摇匀，即得；

精密量取对照品溶液、供试品溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算回收率；

(6)线性

苯磺顺阿曲库铵贮备液：取苯磺顺阿曲库铵对照品约20mg，精密称定，置25ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀；

供试品溶液：精密量取该贮备液4ml、4.5ml、5ml、5.5ml、6ml分别置10ml量瓶中，加乙腈稀释至刻度，摇匀，配制成浓度为320μg/ml、360μg/ml、400μg/ml、440μg/ml、480μg/ml系列浓度的溶液；

精密量取供试品溶液各20μl注入液相色谱仪，每个浓度点平行进两针，记录色谱图；

(7)重复性

对照品溶液：取苯磺顺阿曲库铵对照品10mg两份，精密称定，分别置于25ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀；

供试品溶液：取苯磺顺阿曲库铵样品10mg六份，精密称定，分别置于25ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀；

精密量取供试品溶液与对照品溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算苯磺顺阿曲库铵的含量；

(8)中间精密度

同重复性试验项下的供试品溶液配制，两名分析人员于不同时间、不同仪器进行重复性试验；

精密量取供试品溶液与对照品溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算苯磺顺阿曲库铵的含量；

(9)专属性