[发明专利]大豆种子和油的组成以及产生所述种子的方法

权利要求书

1.产生大豆植物的方法，所述大豆植物包含按重量计算占总种子脂肪酸含量的低于6％的亚麻酸含量、按重量计算占总种子脂肪酸含量的7％或更少的饱和脂肪酸含量和占总种子脂肪酸含量的55％至78％的油酸含量，该方法包括步骤：

a)产生一种或多种大豆植物，具有：

(i)由以下组成的转基因：可操作地与3'端的长度减少至少100个连续核苷酸的SEQ IDNO:1序列的有义和反义大豆FAD2-1内含子#1连接的启动子；SEQ ID NO:28的有义和反义FATB-1 5'未翻译区(UTR)编码序列的长度为至少42个核苷酸的片段；SEQ ID NO:28的FATB-1叶绿体转运肽(CTP)编码区的有义和反义序列的长度为至少40个核苷酸的片段；和降低内源性大豆FAD2-1和FATB-1基因的表达的3’终止或多腺苷酸化区；可操作地与赋予草甘膦抗性的启动子和3’终止或多腺苷酸化区连接的选择性的CP4EPSPS基因；和农杆菌T-DNA边界元件；和

(ii)SEQ ID NO:61或SEQ ID NO:62的内源性大豆FAD3基因中的至少一个功能损失性的突变；

b)获得至少一粒来自步骤(a)中获得的所述大豆植物的种子；

c)对于步骤(b)的所述种子，确定按重量计算的亚麻酸、饱和脂肪酸和油酸占总种子脂肪酸含量的百分数；和

d)鉴定产生具有如下种子脂肪酸组成的种子的大豆植物，所述种子脂肪酸组成包含按重量计算占总种子脂肪酸含量的低于6％的亚麻酸含量、按重量计算占总种子脂肪酸含量的7％或更少的饱和脂肪酸含量和占总种子脂肪酸含量的55％至78％的油酸含量。

2.权利要求1的方法，其中步骤(a)中产生的所述大豆植物包含SEQ ID NO:61的内源性大豆FAD3基因中的功能损失性突变和SEQ ID NO:62的内源性大豆FAD3基因中的功能损失性突变。

3.权利要求2的方法，其中通过来自3'端的100个连续核苷酸缩短所述大豆FAD2-1内含子#1。

4.权利要求3的方法，其中步骤(d)中鉴定的所述大豆植物产生包含按重量计算低于3％的总种子脂肪酸的亚麻酸含量、按重量计算6％或更少的总种子脂肪酸的饱和脂肪酸含量和按重量计算55％至78％的总种子脂肪酸的油酸含量的种子。

5.权利要求1的方法，其中所述大豆植物在步骤(a)中通过以下产生：

i’)将包含权利要求1的步骤(a)(i)所示的所述转基因的第一大豆植物亲本品系与包含SEQ ID NO:61或SEQ ID NO:62的内源性大豆FAD3基因中的至少一个功能损失性突变的第二大豆亲本品系杂交，以获得对于所述转基因是杂合的且对于FAD3基因中的至少一个功能损失性突变是杂合的F1大豆植物；和

ii’)使来自(i’)的F1后代植物自交以获得对于所述转基因是纯合的且对于FAD3基因中的所述功能损失性突变是纯合的F2大豆植物，从而获得包含所述减少内源性大豆FAD2-1基因和内源性FATB-1基因两者的表达的转基因和内源性大豆FAD3基因中的所述功能损失性突变的大豆植物；从而产生步骤(a)的所述大豆植物。

6.权利要求5的方法，其中在步骤(i’)中通过将多个F1植物经历至少一种DNA分析技术来获得对于转基因是杂合的且对于FAD3基因中的至少一个功能损失性突变是杂合的所述F1大豆植物，所述DNA分析技术允许鉴定对于所述转基因是杂合的且对于FAD3基因中的至少一个功能损失性突变是杂合的F1植物。

7.权利要求5的方法，其中在步骤(ii’)中通过将多个F2植物经历至少一种DNA分析技术来获得对于所述转基因是纯合的且对于FAD3基因中的至少一个功能损失性突变是纯合的所述F2大豆植物，所述DNA分析技术允许鉴定对于所述转基因是纯合的且对于FAD3基因中的至少一个功能损失性突变是纯合的F2植物。