[发明专利]一种伞房花耳草叶片成苗的快速繁殖方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种植物繁殖方法，特别是一种伞房花耳草叶片成苗的快速繁殖方法。

背景技术

伞房花耳草，拉丁学名OldenlandiacorymbosaL.，又名蛇舌草、水线草，为茜草科耳草属植物，分布于我国南方各省，产量较大，其干燥全草入药，药材中含有多种三萜类化合物，其中乌索酸含量最高，为其主要活性成分。药理研究发现，乌索酸具有抗肿瘤、抗肝炎、抗病毒、抑菌等多种药理作用，具有重要的开发应用价值。目前伞房花耳草药材及种苗主要来源于野生资源，还没有人工繁育及人工种植技术的报道。为了防止伞房花耳草野生资源遭到严重的人为破坏，保证伞房花耳草资源的可持续利用，需要对伞房花耳草进行种苗繁育技术研究，以保障大规模采挖后能够提供充足的种苗满足资源更新的需要。通过生物技术的组织培养技术，可以有效快速地生产伞房花耳草种苗，实现伞房花耳草优质种苗的工厂化育苗，以满足生产上的需要。

发明内容

本发明的目的是提供一种伞房花耳草叶片成苗的快速繁殖方法，它能够提高伞房花耳草种苗的繁殖速度和质量，实现伞房花耳草优质种苗的工厂化育苗，以满足生产上的需要。

本发明通过以下技术方案达到上述目的：一种伞房花耳草叶片成苗的快速繁殖方法，包括以下步骤：

(1)叶片分化繁殖获得丛生芽：取伞房花耳草无菌试管苗的幼嫩叶片，用解剖刀在叶片背面以#字形划伤后平铺在MS繁殖培养基上，在培养温度为23-27℃，光照强度1000lux，光照时间为6-8小时/天的条件下培养30天得到试管苗丛生芽，其中MS繁殖培养基为MS基本培养基中加入0.5-2.0mg/L的苄基腺嘌呤6-BA、0.1-0.3mg/L的吲哚乙酸IAA、0.1-1.0mg/L的激动素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8；

(2)丛生芽壮苗培养：将步骤(1)中得到的试管苗丛生芽置于MS壮苗培养基中，在培养温度23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为10-12小时/天的条件下培养20天得到健壮丛生芽，其中MS壮苗培养基为MS基本培养基中加入0.5-3.0mg/L的苄基腺嘌呤6-BA、0.1-0.3mg/L的吲哚乙酸IAA、0.1-1.0mg/L的激动素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8；

(3)丛生芽生根培养：将步骤(2)中得到的健壮丛生芽切成带顶芽或叶芽的茎段，置于1/2MS生根培养基中，在培养温度23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为12-14小时/天的条件下培养30天得到带根的完整植株，其中1/2MS生根培养基为1/2MS基本培养基中加入0.1-1.0mg/L的吲哚乙酸IAA、0.1-0.3mg/L的生根粉ABT、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8。

本发明的突出优点在于：

(1)采用组织培养技术繁育伞房花耳草种苗具有繁殖速度快、种苗质量均一，且不受时间、空间、季节限制的突出优点，缩短了种苗繁育周期，提高了种苗质量，实现规模化生产，满足生产上的需要。

(2)通过幼嫩叶片为外植体诱导分化获得大量的丛生芽，为伞房花耳草组培苗的获得提供了新的途径。

(3)采用本发明所述的培养方法得到的伞房花耳草丛生芽增殖系数达到20-30倍，丛生芽健壮，接种到生根培养基后容易生根，生根率可达96％以上，炼苗后移栽苗床成活率达到90％；快速、便捷、高效地进行伞房花耳草组织培养，实现伞房花耳草组培种苗的规模化生产。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明的技术方案进一步说明。

实施例1

本发明所述的伞房花耳草叶片成苗的快速繁殖方法的一个实例，包括以下步骤：

(1)叶片分化繁殖获得丛生芽：取伞房花耳草无菌试管苗的幼嫩叶片，用解剖刀在叶片背面以#字形划伤后平铺在MS繁殖培养基上，在培养温度为23-27℃，光照强度1000lux，光照时间为6-8小时/天的条件下培养30天得到试管苗丛生芽，其中MS繁殖培养基为MS基本培养基中加入0.5mg/L的苄基腺嘌呤6-BA、0.1mg/L的吲哚乙酸IAA、0.1mg/L的激动素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，丛生芽增殖系数为27.8；